QSG-7701人肝细胞

QSG-7701人肝细胞是源自正常人类肝组织的贴壁生长细胞系，因保留肝细胞的核心生理功能（如物质代谢、解毒、蛋白合成），且体外培养稳定性高，成为研究肝脏生理病理机制、药物代谢与肝毒性评估的经典体外模型，为肝病研究、药物研发及临床转化提供关键实验支撑。

一、核心生物学特性

细胞来源上，QSG-7701 细胞分离自健康人肝脏组织，经体外培养建系后，持续保留正常肝细胞的形态与功能特征，无肿瘤细胞的恶性增殖特性，是模拟体内正常肝脏生理状态的理想细胞模型。形态上，QSG-7701 细胞呈多边形或梭形，贴壁生长时呈 “铺路石" 样排列，细胞间连接紧密，胞质丰富且含有大量线粒体（参与能量代谢）与内质网（参与蛋白合成），细胞核大而圆，核仁清晰，符合正常肝细胞的典型形态特征。

功能特性方面，QSG-7701 细胞具备正常肝细胞的核心生理功能：可高效合成白蛋白、尿素等肝细胞特异性产物，其合成能力与体内正常肝细胞接近，可用于评估肝脏合成功能；表达多种药物代谢酶，如细胞色素 P450 酶系（CYP450，如 CYP1A2、CYP2C9、CYP3A4），能模拟体内药物的 Ⅰ 相代谢过程，为药物代谢研究提供关键工具；同时具有一定的解毒功能，可清除体内代谢废物与外源毒性物质，且对肝损伤诱导剂（如 CCl?、D - 氨基半乳糖）敏感，能模拟肝损伤病理过程，为肝病机制研究提供模型基础。此外，细胞基因组稳定性优异，传代过程中染色体数目与结构不易变异，确保实验结果的可重复性。

二、体外培养关键条件

基础培养基选择以 RPMI-1640 或 DMEM（高糖）为主，需添加 10%-15% 胎牛血清（需筛选批次，确保含肝细胞生长必需的激素、生长因子），满足细胞对营养物质的需求，同时加入 1% 无菌防护试剂预防细菌污染。为维持肝细胞功能，可额外添加 20μg/mL 胰岛素，促进细胞合成代谢与功能维持；培养基 pH 需控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 280-320mOsm/kg，可通过添加 HEPES 缓冲液（终浓度 10mM）增强 pH 稳定性，避免环境波动影响细胞活性。

培养环境需严格控制为 37℃、5% CO?的恒温恒湿条件，培养箱内湿度保持在 95% 以上，防止培养基因水分蒸发导致渗透压升高。因细胞贴壁生长，传代时需先用消化液处理（37℃孵育 1-2 分钟），待细胞间隙增大、形态变圆后，加入含血清的培养基终止消化，轻轻吹打制成单细胞悬液，按 1:3-1:5 的比例接种至新培养瓶，传代周期约 3-4 天，需在细胞汇合度达到 80%-90% 时进行传代，避免细胞过度密集导致接触抑制，影响功能表达。

细胞维护过程中，每日需通过倒置显微镜观察细胞状态：若发现细胞形态变圆、脱壁增多，或培养基出现浑浊、颜色变黄（pH 下降），需及时更换培养基或排查污染；若细胞生长缓慢，可检测血清中生长因子含量或调整胰岛素浓度，维持细胞活性。细胞冻存时，需使用含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的胎牛血清作为冻存液，采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→转入液氮保存），减少冰晶形成对细胞的损伤，复苏时需快速解冻并立即加入培养基稀释，提高复苏存活率。

三、主要实验应用场景

在肝脏生理病理机制研究中，QSG-7701 细胞是核心模型?？蒲腥嗽笨赏ü菇ǜ嗡鹕四Ｐ停ㄈ?CCl?诱导），观察细胞形态变化、肝功能指标（白蛋白合成、尿素生成）及炎症因子（IL-6、TNF-α）表达变化，解析肝损伤的分子机制；也可通过干扰肝脏相关基因（如 HNF4α、CYP3A4），研究基因对肝细胞功能的调控作用，为理解肝脏生理功能与疾病发生机制提供理论支撑。

药物代谢与肝毒性评估领域，QSG-7701 细胞应用广泛?？衫孟赴泶锏?CYP450 酶系，研究药物在体外的代谢途径与代谢产物，明确药物代谢关键酶，为药物剂型优化与药物相互作用研究提供数据；同时，通过将不同浓度的药物作用于细胞，检测细胞活力、肝功能指标及凋亡率，评估药物对肝脏的潜在毒性，筛选低肝毒性药物，为药物研发的安全性评价提供关键依据。

在肝病治疗研究中，QSG-7701 细胞可用于治疗药物的效果验证。将保肝药物（如甘草酸制剂）作用于肝损伤模型细胞，观察细胞功能恢复情况（如白蛋白合成增加、炎症因子下降），评估药物的保肝效果；也可用于干细胞或基因治疗的初步研究，如将间充质干细胞分泌的外泌体作用于受损 QSG-7701 细胞，观察其对细胞修复的促进作用，为肝病治疗新策略提供实验基础。

四、实验应用注意事项

实验前需通过 Western blot 或 ELISA 验证细胞功能标志物（如白蛋白、CYP3A4）的表达水平，确保细胞功能稳定，避免因传代次数过多（建议传代不超过 20 代）导致功能退化，影响实验结果的可靠性；不同批次胎牛血清对细胞功能影响较大，需通过预实验筛选能维持细胞 CYP450 酶活性与白蛋白合成能力的血清批次，固定使用以保证实验一致性。

贴壁细胞消化过程需严格控制消化时间，避免消化过度导致细胞损伤或消化不充分影响传代效率，建议在显微镜下实时观察细胞状态，待细胞边缘收缩、间隙增大时立即终止消化。操作时需严格无菌，QSG-7701 细胞对污染敏感，尤其是真菌污染易导致细胞功能异常，每传代 3 次需通过 PCR 法检测支原体，若发现污染需立即丢弃，防止交叉感染。

结果解读需结合体内生理环境，QSG-7701 细胞虽保留肝细胞核心功能，但体外培养条件无法模拟体内肝脏的微环境（如细胞间相互作用、血流动力学），药物代谢效率与肝毒性反应可能与体内存在差异，实验结论需结合动物实验或临床数据综合分析；同时，需注意细胞与肿瘤肝细胞系（如 HepG2）的差异，QSG-7701 细胞无恶性特征，更适用于正常肝脏生理与非肿瘤性肝病研究，不可替代肿瘤细胞系用于肝癌相关实验。