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更新时间:2025-10-27
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Ramos人B淋巴细胞瘤细胞
Ramos人B淋巴细胞瘤细胞是研究 B 细胞淋巴瘤及免疫系统相关疾病的重要体外模型,源自人伯基特淋巴瘤患者的肿瘤组织,因能稳定保留 B 淋巴细胞瘤的核心生物学特征,在淋巴瘤发病机制解析、药物敏感性测试及免疫功能研究等领域应用广泛,为科研人员探索 B 细胞相关恶性肿瘤的防治提供了关键实验载体。
一、核心生物学特性
从细胞来源来看,该细胞系分离自临床伯基特淋巴瘤患者的肿瘤组织,经体外培养建系后,仍维持原代 B 淋巴细胞瘤细胞的关键表型。形态上,Ramos 细胞呈典型圆形或椭圆形,体外培养时以悬浮生长为主,部分细胞会轻微聚团,细胞核大且呈圆形或椭圆形,核仁明显,胞质少而透明,符合 B 淋巴细胞瘤细胞的形态特征。
功能特性方面,Ramos 细胞具备 B 淋巴细胞瘤的恶性生物学行为,如较强的增殖能力,细胞周期进程异常,S 期细胞比例升高,导致细胞快速分裂增殖;同时,其具有 B 淋巴细胞的部分功能特征,可表达 B 细胞表面特异性标志物,如 CD19、CD20、CD22,以及免疫球蛋白 M(IgM),这些标志物不仅是鉴定该细胞的重要依据,也为研究 B 细胞的分化与活化机制提供了靶点。此外,Ramos 细胞对某些信号通路的调控异常敏感,如 B 细胞受体(BCR)信号通路,该通路的异常激活与 B 细胞淋巴瘤的发生发展密切相关,使得该细胞成为研究该通路功能及相关药物作用的理想模型。
二、体外培养关键条件
基础培养基的选择直接影响细胞生长状态,Ramos 细胞常规使用 RPMI-1640 培养基,需添加 10%-15% 胎牛血清以补充生长必需的营养成分(如氨基酸、生长因子),同时加入 1% 无菌防护试剂,抑制细菌污染。培养基 pH 值需维持在 7.2-7.4,渗透压控制在 280-320mOsm/kg,确保细胞正常代谢。
培养环境需严格控制,细胞需置于 37℃、5% CO?的恒温培养箱中,培养箱内湿度保持在 95% 以上,避免培养基过度蒸发导致渗透压改变。由于细胞以悬浮生长为主,传代操作相对简便,无需使用消化试剂,直接收集细胞悬液,按 1:2-1:4 的比例接种至新鲜培养基即可,传代周期一般为 2-3 天,具体可根据细胞密度调整(通常细胞密度达到 1×10?-2×10?个 /mL 时进行传代)。
细胞维护过程中,需每日观察细胞状态:若发现细胞聚团过大、胞质出现颗?;蚺嘌胱牵赡芴崾鞠赴盍ο陆祷蛭廴?;若细胞生长缓慢,可检查血清质量或调整培养温度。此外,细胞冻存时需使用含 10% 二甲基亚砜(DMSO)的胎牛血清作为冻存液,梯度降温后置于液氮中保存,复苏时需快速解冻并立即加入培养基,减少细胞损伤。
三、主要实验应用场景
在 B 细胞淋巴瘤发病机制研究中,Ramos 细胞是理想模型??蒲腥嗽笨赏ü虮嗉际酰ㄈ?CRISPR-Cas9)敲除或过表达目标基因,观察细胞增殖、凋亡及分化状态的变化,探究基因(如 MYC、BCL-2)在 B 细胞淋巴瘤发生发展中的作用;也可通过转录组测序、蛋白质组学分析,筛选淋巴瘤相关的差异表达基因与蛋白,为解析发病机制提供线索。
药物研发与敏感性检测领域,Ramos 细胞应用广泛??山煌ǘ鹊闹瘟埔┪锘虬邢蛞┪铮ㄈ?CD20 单克隆抗体)作用于细胞,通过 MTT 法、CCK-8 法检测细胞活力,计算半数抑制浓度(IC50),评估药物对 B 淋巴细胞瘤细胞的杀伤效果;也可构建药物耐药细胞株,研究耐药机制,为逆转耐药提供实验依据。
在免疫功能研究方面,Ramos 细胞可用于探究 B 细胞的活化与信号传导机制。通过刺激 B 细胞受体(BCR)或添加细胞因子(如 IL-4、IL-6),观察细胞的活化状态及相关信号分子(如 SYK、PI3K)的表达与磷酸化水平,深入了解 B 细胞的免疫功能调控过程,为自身免疫性疾病及免疫缺陷疾病的研究提供支持。
四、实验应用注意事项
实验前需确保细胞处于对数生长期,此时细胞活力高(通常>90%),增殖能力稳定,能保证实验结果的重复性。不同批次胎牛血清成分存在差异,可能影响细胞生长与药物反应,建议固定血清品牌,并通过预实验验证血清适用性。
悬浮细胞对污染更为敏感,操作时需严格无菌,定期检测细胞是否存在支原体污染,若发现污染需及时丢弃,避免交叉感染。同时,传代时需注意细胞浓度,浓度过高易导致营养不足,过低则会影响增殖速度,需精准控制接种密度。
结果解读需结合体内实验,Ramos 细胞虽能模拟 B 淋巴细胞瘤的部分特性,但体外培养环境与体内肿瘤微环境存在差异,如缺乏免疫细胞浸润、细胞外基质支持等,实验结果需结合动物模型或临床样本数据综合分析,避免单一依赖细胞模型导致结论偏差。
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