SKHEP-1人肝腹水腺癌细胞

SKHEP-1人肝腹水腺癌细胞是源自人肝癌伴腹水患者的贴壁生长肿瘤细胞系，因能稳定保留肝腹水腺癌的典型病理特征、肝源性分子表型及腹水相关侵袭转移潜能，成为肝癌腹水领域基础研究、药物研发及临床转化实验的核心工具细胞。该细胞系从临床晚期肝癌伴腹水患者的腹水样本中分离纯化获得，经长期传代驯化与功能验证，不仅继承了原代肝腹水腺癌细胞 “增殖活跃、易适应体液微环境、腹水播散能力强" 的基础属性，还通过克隆筛选优化，显著提升了表型稳定性与实验重复性，被全球科研机构广泛用于肝腹水腺癌发病机制解析、抗肝腹水肝癌药物体外评估及腹水微环境互作研究，为肝癌腹水这一预后极差的临床难题研究提供了关键支撑。

从生物学特性来看，SKHEP-1 细胞呈现典型的肝腹水腺癌细胞形态，贴壁生长时以多边形、短梭形为主，胞体大小差异明显（直径约 14-22μm），边界清晰，排列呈松散的 “上皮样" 单层或局部堆叠结构（模拟肝癌细胞在腹水环境中贴附腹膜生长的特征），近 80% 细胞可见短钝伪足（反映其适应腹水微环境、易黏附侵袭的形态特征）。胞质丰富呈淡嗜酸性，内含与肝源性功能相关的特异性细胞器 —— 如少量糖原颗粒（肝细胞特征性储存物质，在肿瘤细胞中部分保留）、发达的线粒体（支撑细胞在腹水低氧环境下的能量代谢需求），部分细胞胞质内可见微小空泡（与肝癌细胞脂质代谢异?；蚍置诠δ芟喙兀?；细胞核呈圆形或椭圆形，多为单核，核仁明显（1-2 个），染色质呈细颗粒状分布，核质比约为 1:1.6（符合晚期肝癌伴腹水细胞中等偏强的恶性程度特征，高于早期肝癌细胞）。增殖活性中等偏强（倍增时间约 36-48 小时，适配肝癌腹水细胞在体液微环境中的生长速率），传代 65 代后仍保持稳定的肝源性表型与腹水相关侵袭特性，无明显衰老或表型漂移迹象。其核心生物学特征是肝源性标志物表达与腹水相关侵袭潜能：免疫检测显示，细胞高表达肝癌核心标志物 —— 甲胎蛋白（AFP，阳性率＞85%，肝癌诊断关键标志物）、细胞角蛋白 19（CK19，阳性率＞90%，胆管上皮及部分肝癌特异性标志物），同时表达腹水侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶 9（MMP-9，阳性率＞75%，促进细胞突破腹膜屏障）；分子层面存在 β-catenin 基因异常激活（与肝癌细胞增殖、转移密切相关）与 VEGF 通路高表达（促进腹水形成与血管新生，适配腹水微环境）；功能上，Transwell 实验中穿膜细胞数在模拟腹水的低黏附基质中显著升高，接种裸鼠腹腔 2-3 周即可形成大量腹水及腹膜种植结节，wan美复现肝癌腹水的形成与播散过程，为肝腹水腺癌机制研究提供理想模型。

在细胞培养操作层面，SKHEP-1 人肝腹水腺癌细胞的核心要求是维持肝源性表型与腹水相关侵袭特性，培养方案需适配其体液微环境适应需求与贴壁特性。适宜环境为 37℃、5% CO?的恒温培养箱，培养基优先选用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合培养基（该配方兼顾贴壁细胞生长与体液微环境代谢偏好，胎牛血清需选择内毒素含量＜5EU/mL 的批次，避免内毒素刺激导致细胞炎症反应或腹水相关通路异常激活）。日常培养中，需每 2 天更换一次新鲜培养基（细胞代谢旺盛，且需维持稳定的营养环境以保留腹水相关特性，避免代谢废物积累影响细胞活性），更换时沿培养瓶壁缓慢注入培养基，避免冲击细胞层导致伪足脱落（伪足完整性对腹水侵袭实验结果至关重要）；传代时机为细胞融合度达到 70%-80%（细胞接触抑制功能较弱，过度密集易导致细胞堆积与活性下降，该融合度可平衡增殖效率与细胞功能），操作步骤需注意：先用 37℃预热的 PBS 轻柔清洗细胞 2 次（减少血清残留对消化酶活性的干扰，同时避免过度清洗损伤细胞表面黏附分子），加入细胞消化液后 37℃孵育 2-3 分钟（细胞贴壁能力中等，消化时间过长易导致细胞破碎），待细胞边缘收缩、间隙增大后立即终止，加入含血清的培养基中和消化酶，用移液器轻柔吹打至单细胞悬液（避免剧烈吹打破坏细胞表面与腹水侵袭相关的蛋白），按 1:3-1:5 比例接种至新培养瓶，接种密度控制为 3×10? - 5×10? cells/cm2（该密度可使细胞快速进入对数生长期，同时避免低密度导致的肝源性表型丢失）。

在科研应用领域，SKHEP-1 人肝腹水腺癌细胞凭借腹水相关特性与肝源性特征，展现出不可替代的研究价值。在肝腹水腺癌机制研究领域，是解析腹水形成与播散通路的理想模型：例如，通过抑制 VEGF 通路，观察细胞分泌 VEGF 的水平变化、裸鼠腹腔腹水量及腹膜种植情况，明确 VEGF 对肝癌腹水形成的驱动作用；或通过调控 β-catenin 表达，分析细胞增殖速率、MMP-9 活性及侵袭能力改变，揭示该通路在肝癌细胞腹水播散中的功能，为理解 “肝癌进展 - 腹水形成 - 腹膜转移" 的恶性循环机制提供依据。在抗肝腹水肝癌药物筛选领域，因细胞特性稳定且具腹水模型代表性，成为抗腹水肝癌药物体外评估的关键工具：可用于广谱抗肝腹水肝癌药物（如天然化合物、抗血管生成药物）的活性筛选，通过 CCK-8 法检测药物对细胞增殖的抑制率，结合酶联免疫法检测药物对 VEGF 分泌的影响；也可用于靶向腹水微环境药物（如腹膜黏附抑制剂、腹水减少药物）的特异性评估，通过 Transwell 实验检测药物对细胞侵袭的阻断效果，验证药物作用靶点的有效性，尤其适用于晚期肝癌伴腹水患者的药物研发需求。在腹水微环境研究领域，可与腹膜间皮细胞、腹水来源巨噬细胞共培养，模拟肝癌细胞与腹水微环境细胞的相互作用：例如，探究腹水巨噬细胞分泌的细胞因子（如 IL-10、TGF-β）对 SKHEP-1 细胞 VEGF 表达的影响，或分析腹膜间皮细胞损伤后对肝癌细胞黏附种植的促进作用，为靶向腹水微环境的联合治疗策略开发提供依据。此外，在肝腹水腺癌诊断技术研发领域，可利用细胞表达的 AFP、CK19 等特异性标志物，开发肝癌腹水诊断抗体或检测试剂盒，通过细胞水平验证诊断试剂的特异性与灵敏度，为临床肝癌腹水的早期诊断（尤其与其他恶性腹水的鉴别诊断）提供技术支撑。

综上所述，SKHEP-1 人肝腹水腺癌细胞凭借其稳定的肝源性表型、明确的腹水相关侵袭特性及临床模型代表性，成为连接肝腹水腺癌基础研究与临床转化的关键工具，尤其在肝癌腹水机制解析、针对性药物研发及诊断技术开发中具有不可替代的价值，为推动肝癌腹水研究突破及晚期肝癌精准治疗发展提供了坚实的细胞模型支撑。