ME 小鼠黑色素瘤瘤株

ME 小鼠黑色素瘤瘤株是黑色素瘤研究领域应用广泛的小鼠源性移植瘤模型，多源于小鼠自发性皮肤黑色素瘤组织，或经体外传代驯化的黑色素瘤细胞系构建而成。其因能在匹配小鼠体内稳定成瘤、精准保留黑色素瘤核心恶性表型，成为解析黑色素瘤发病机制、评估药物体内疗效及探索肿瘤免疫交互作用的核心工具，为衔接黑色素瘤基础研究与临床转化提供了关键实验载体。

从瘤株来源与核心生物学特性来看，该模型的建立背景高度契合黑色素瘤病理特征，其独特属性为研究提供了显著优势。来源上，常见分离自近交系小鼠（如 C57BL/6、BALB/c 等，具体依亚型而定）的自发性黑色素瘤组织，经体内多次移植传代驯化后，剔除杂细胞并保留纯系肿瘤细胞特性；部分亚型也可通过体外培养的小鼠黑色素瘤细胞（如 B16 细胞系衍生株）构建，确保遗传背景清晰、表型稳定。核心特性方面，首要优势是体内成瘤稳定性强：将其接种于同品系野生型小鼠或免疫缺陷小鼠（如裸鼠）皮下、皮内后，1-2 周即可形成可触及的肿瘤结节，成瘤率可达 90% 以上，且肿瘤生长速率均匀，3-4 周内体积可稳定增长至 100-300mm3，便于通过测量肿瘤体积、重量量化评估实验效果。其次，保留黑色素瘤典型功能特征 —— 肿瘤细胞可合成并分泌黑色素颗粒，病理切片经染色后可见胞质内棕黑色色素沉积，与临床黑色素瘤患者肿瘤组织的色素化特征高度一致，可通过色素含量检测辅助判断瘤株纯度与活性。此外，部分亚型还具备一定转移能力：经尾静脉或脾接种后，可在小鼠肺、肝等器官形成转移灶，转移率因亚型而异，为研究黑色素瘤远处转移机制提供了适配模型。分子层面，稳定表达黑色素瘤特异性标志物，如酪an酸酶（TYR，黑色素合成关键酶）、S100 蛋白、HMB-45（黑色素瘤诊断相关抗原），且常携带黑色素瘤常见基因突变（如 BRAF V600E、NRAS 突变等，依亚型不同存在差异），遗传背景与宿主小鼠匹配度高，可减少免疫排斥对实验结果的干扰。

在体内建模与瘤株维护方面，该模型的操作流程成熟，但需严格把控细节以确保成瘤效果与表型稳定。首先是宿主小鼠选择：若研究肿瘤与免疫系统的交互作用（如免yi治疗评估），优先选用与来源一致的近交系野生型小鼠（如 C57BL/6 背景亚型搭配 C57BL/6 小鼠）；若需排除宿主免疫影响（如单纯药物抑瘤实验），可选用裸鼠（T 细胞缺陷）或 NOD/SCID 小鼠（T、B 细胞双缺陷），避免免疫清除导致成瘤失败。建模方式主要有三种：一是皮下接种，将对数生长期的瘤细胞悬液（浓度 1×10?-5×10?个 /mL）注射于小鼠背部皮下，操作简便、成瘤率高，适合大规模药物筛选与疗效评估；二是皮内接种，将瘤细胞注射于小鼠耳后或腹部皮内，更贴近黑色素瘤皮肤原发灶的生长微环境，可观察肿瘤与皮肤组织的侵袭交互过程；三是静脉接种，将瘤细胞悬液经尾静脉注射，模拟黑色素瘤血行转移过程，常用于肺转移模型构建。维护需注意：体外培养的瘤细胞需在对数生长期收集，台盼蓝染色活率需≥95%，避免死细胞过多影响成瘤；体内传代时，待肿瘤生长至直径 1-1.5cm（未出现破溃）时，无菌剥离肿瘤组zhi，剪碎后用细胞消化液处理制备单细胞悬液，再接种至新宿主小鼠，每代传代间隔 3-4 周，传代次数建议不超过 10 代，防止长期传代导致表型漂移（如黑色素合成能力下降、转移潜能减弱）。

在科研应用领域，该模型凭借 “成瘤稳定、表型贴近临床" 的优势，覆盖黑色素瘤研究的多个关键方向。在发病机制研究中，它是解析黑色素瘤恶性进展的核心模型：科研人员可通过基因编辑技术（如 CRISPR/Cas9 敲除、慢病毒过表达）调控瘤细胞中目标基因（如 BRAF、PTEN、MITF 等），再构建移植瘤模型，观察肿瘤生长速率、转移能力的变化，结合肿瘤组织分子检测（如 Western Blot、免疫组化），揭示基因对黑色素瘤增殖、侵袭、转移的调控作用，目前已通过该模型明确 MAPK、PI3K/Akt 等信号通路在黑色素瘤进展中的关键地位。在药物研发领域，是黑色素瘤药物体内疗效评价的 “黄金标准"：无论是小分子靶向药物（如 BRAF 抑制剂）、大分子抗体药物，还是中药提取物、新型联合治疗方案，均可通过皮下移植瘤模型评估抑瘤效果 —— 通过定期测量肿瘤体积，计算抑瘤率（抑瘤率 =（对照组平均肿瘤体积 - 给药组平均肿瘤体积）/ 对照组平均肿瘤体积 ×100%），同时检测肿瘤组织中增殖标志物（Ki-67）、凋亡标志物（Caspase-3）的表达，综合判断药物疗效；对于转移相关药物，还可通过静脉接种模型，计数肺、肝转移灶数量，评估药物对转移的抑制作用。此外，在肿瘤免疫研究中，构建的野生型小鼠移植瘤模型可模拟黑色素瘤与宿主免疫系统的交互作用，用于探索肿瘤免疫逃逸机制（如 PD-L1 表达对 T 细胞功能的抑制）、评估免yi治疗方案（如 PD-1/PD-L1 抗体治疗）的效果，为黑色素瘤免yi治疗策略优化提供实验依据。

使用时需注意三点关键事项：一是明确亚型特性，不同亚型在基因突变类型、黑色素合成能力、转移潜能上存在差异，需根据实验目的（如研究 BRAF 突变机制、构建高转移模型）选择匹配亚型，避免因亚型不匹配导致实验偏差；二是定期验证纯度与表型，每传代 3-5 代需通过病理染色观察黑色素沉积、Western Blot 检测特异性标志物（TYR、HMB-45）、体内成瘤实验验证成瘤率与生长速率，确保未被杂细胞污染且表型稳定；三是严格遵守动物实验伦理，肿瘤生长至伦理允许体积（通常不超过 2000mm3）或小鼠出现明显痛苦症状（如精神萎靡、体重骤降）时，需及时处死小鼠，减少动物痛苦。

综上，该模型以其稳定的成瘤能力、贴近临床的恶性表型，成为黑色素瘤基础研究与药物研发的重要支撑，为深入解析黑色素瘤发病机制、开发高效治疗方案提供了不可替代的实验模型，对推动黑色素瘤研究领域的发展具有重要意义。