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更新时间:2025-11-03
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MFC小鼠前胃癌细胞
MFC小鼠前胃癌细胞是我国自主建立并广泛应用的小鼠源性前胃癌细胞系,源于 615 近交系小鼠的自发性前胃癌组织,因能精准模拟小鼠体内胃癌的早期发生发展过程、表型稳定且易构建体内外实验模型,成为胃癌基础机制研究、药物体内外评价及肿瘤微环境探索的核心工具,为衔接胃癌体外研究与体内验证提供了关键实验载体。
从细胞来源与核心生物学特性来看,MFC 细胞的建立背景与小鼠胃癌病理特征高度契合,其独特属性为胃癌研究提供了显著优势。来源上,该细胞系通过对 615 小鼠自发性前胃癌组织进行原代分离、体外纯化培养及克隆筛选获得,保留了前胃癌细胞的典型病理特征 —— 前胃癌作为胃癌的早期阶段,兼具 “局部生长为主、侵袭性较弱但易向进展期胃癌转化" 的特点,MFC 细胞精准复现了这一病理过程,为研究胃癌早期癌变机制、筛选阻断癌变进展的干预手段提供了理想模型。形态层面,MFC 细胞呈典型上皮样贴壁生长,显微镜下可见细胞排列紧密、呈不规则多边形,核质比适中,核仁清晰可见,具备肿瘤细胞te有的异型性,且这种形态特征在传代 30 代后仍能稳定维持,无明显表型漂移,保障了实验结果的可重复性。功能层面,MFC 细胞zui突出的特性是体内成瘤能力强且可控:将其接种于同品系 615 小鼠或免疫缺陷裸鼠的皮下或胃壁原位,可在 2-3 周内形成稳定的肿瘤结节,其中皮下成瘤率高达 95% 以上,肿瘤生长速率均匀,便于通过测量肿瘤体积、重量量化评估药物疗效;胃原位成瘤则能更真实地模拟临床胃癌的生长环境,包括肿瘤与胃黏膜组织的黏附、侵袭交互,以及肿瘤微环境中血管生成、免疫细胞浸润等过程,为研究胃癌的原位进展机制提供了贴近临床的模型。此外,MFC 细胞体外增殖能力适中,群体倍增时间约 36-48 小时,既便于体外实验中对细胞状态的把控,又能避免因增殖过快导致的细胞功能异常。分子层面,MFC 细胞稳定表达胃癌相关标志物,如癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白 18(CK18),部分样本还检测到胃癌常见的信号通路异常(如 Wnt/β-catenin 通路激活、PI3K/Akt 通路异常),且其遗传背景与 615 小鼠高度匹配,为后续体内实验的免疫兼容性、结果可靠性提供了保障。
在细胞培养与维护方面,MFC 细胞的培养条件相对温和,但需严格把控细节以维持其体内成瘤能力与核心生物学特性?;∨嘌萍鍪?span id="rb15jfhhv" class="auto-space" style="font-size: 18px; font-family: arial, helvetica, sans-serif; -webkit-font-smoothing: antialiased; margin: 0px; padding: 0px; letter-spacing: 0.25em;">用RPMI-1640 培养基(含细胞生长必需的氨基酸、维生素及缓冲体系,能更好满足其代谢需求),添加 10% 胎牛血清(FBS,需筛选无支原体、低内毒素的优质批次 —— 血清质量直接影响细胞的增殖活性与体内成瘤率,劣质血清可能导致细胞成瘤能力下降或表型改变)和 1% 抗污染试剂(有效抑制细菌、真菌污染,避免因污染影响实验进度)。培养环境需严格遵循 37℃恒温、5% CO?饱和湿度的标准,且需特别注意细胞密度控制:当细胞汇合度达到 80%-90% 时需及时传代,若过度汇合会导致细胞接触抑制,不仅会降低增殖速率,还可能影响细胞的体内成瘤能力与侵袭特性;传代时采用含 EDTA 的细胞消化液,37℃孵育 1-2 分钟,待细胞间隙明显增大、形态变圆后立即终止消化,传代比例建议为 1:3-1:4,避免消化过度损伤细胞表面的黏附分子(如 E - 钙粘蛋白、整合素等,此类分子与细胞的侵袭能力、体内成瘤后的组织黏附密切相关)。细胞冻存需采用含 10% DMSO 的胎牛血清冻存液,按 “4℃放置 30 分钟→-20℃静置 1 小时→-80℃过夜→转入液氮长期保存" 的梯度降温流程操作,复苏时需将冻存管迅速放入 37℃水浴中快速融化,离心去除 DMSO 后接种至新鲜培养基,可将细胞存活率提升至 85% 以上,最da程度保留其原有的生物学功能与体内成瘤活性。
在科研应用领域,MFC 细胞凭借 “小鼠源性、体内成瘤稳定、贴近胃癌早期病理特征" 的优势,广泛覆盖胃癌研究的多个关键方向。在胃癌基础机制研究中,它是解析早期胃癌进展机制的核心工具:科研人员通过体外基因编辑技术(如 siRNA 沉默、过表达载体转染、CRISPR/Cas9 基因敲除)调控 MFC 细胞中目标基因(如 Cyclin D1、p53、Bcl-2 等与细胞增殖、凋亡相关的基因),观察细胞体外增殖、凋亡、侵袭能力的变化,再结合体内成瘤实验,验证目标基因对胃癌早期进展的调控作用,目前已通过该模型揭示了多个胃癌早期癌变相关的分子通路,为挖掘潜在治疗靶点提供了直接实验证据。在药物研发领域,MFC 细胞是胃癌药物体内外评价的 “黄金模型":体外可通过 MTT 法、CCK-8 法检测药物对细胞增殖的抑制率,筛选潜在的抗胃癌化合物;体内可构建 MFC 细胞皮下移植瘤或胃原位移植瘤模型,通过定期测量肿瘤体积、重量,检测肿瘤组织中增殖标志物(如 Ki-67)、凋亡标志物(如 Caspase-3)的表达水平,评估药物的体内抑瘤效果,目前已广泛用于中药提取物、新型小分子化合物、靶向药物的临床前疗效评价。此外,在肿瘤微环境研究中,MFC 细胞构建的胃原位移植瘤模型能真实模拟小鼠体内胃癌微环境的构成,包括肿瘤相关巨噬细胞(TAM)浸润、血管内皮细胞增殖、淋巴细胞募集等,为探索胃癌微环境的调控机制、开发针对肿瘤微环境的免yi治疗策略(如免疫检查点抑制剂联合治疗)提供了理想的实验平台。
使用 MFC 细胞时需注意两点关键事项:一是长期培养过程中需定期验证细胞特性,通过形态观察、Western Blot 检测 CEA 等胃癌标志物、STR 鉴定排除细胞交叉污染与表型漂移,同时建议每 10 代进行一次体内成瘤实验,验证其成瘤能力是否稳定,确保实验结果的可靠性;二是因该细胞源于 615 近交系小鼠,构建体内模型时优先选择同品系小鼠以减少免疫排斥反应对实验结果的影响,若使用裸鼠等免疫缺陷小鼠,需注意小鼠的免疫缺陷程度(如 T 细胞、B 细胞缺陷情况)对肿瘤生长速率的潜在影响。同时,所有涉及动物实验的研究均需严格遵守动物实验伦理规范,实验操作需符合生物安全二级实验室的要求。
综上,MFC 小鼠前胃癌细胞以其贴近小鼠胃癌早期病理特征、体内成瘤稳定、易操作的优势,成为连接胃癌体外机制研究与体内实验验证的重要桥梁,为深入解析胃癌早期进展机制、研发高效治疗药物及探索肿瘤微环境调控策略提供了不可替代的实验支撑,对推动胃癌研究领域的发展具有重要意义。
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