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更新时间:2025-12-08
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RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞是免疫细胞生物学与炎症研究的核心模式细胞系,1978年从Abelson小鼠白血病病毒诱导的BALB/c小鼠肿瘤中分离建立,隶属于髓系造血系统肿瘤细胞系。该细胞系因稳定保留单核巨噬细胞的核心功能特征,且具备无限增殖能力,成为解析巨噬细胞活化机制、炎症调控及病原体感染的经典实验模型,在免疫医学、药理学等领域应用广泛。
生物学特性上,RAW 264.7细胞呈现典型的巨噬细胞形态,体外以贴壁生长为主,部分细胞轻微悬浮,形态呈圆形、梭形或多角形,胞质丰富呈嗜碱性,核呈肾形或马蹄形,核仁清晰可见。其核心特征是兼具巨噬细胞功能与肿瘤细胞特性:一方面可被脂多糖(LPS)、干扰素-γ(IFN-γ)等诱导为M1型炎性巨噬细胞,高表达CD86、MHC II类分子及炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β);另一方面保留无限增殖能力,倍增时间约18-24小时,核型为近四倍体,携带Abelson病毒癌基因v-abl,这是其恶性表型的分子基础。此外,该细胞高表达巨噬细胞特异性标志物CD11b、F4/80,具备强大的吞噬功能,可有效吞噬乳胶颗粒及病原体。
体外培养RAW 264.7细胞需精准维持其巨噬细胞功能表型,zui适培养环境为37℃、5% CO?的恒温恒湿培养箱,推荐使用添加10%胎牛血清(FBS)、1%抗菌药物混合液的DMEM高糖培养基,添加2mM氨基戊二酸可提升细胞增殖稳定性。培养过程中需密切监测细胞状态,当融合度达到70%-80%时及时传代,避免过度融合导致细胞活性下降。传代前无需严格消化,用无菌PBS轻柔吹打即可使大部分细胞脱落,顽固贴壁细胞可补充0.25%消化酶-EDTA溶液作用30秒-1分钟,随后加入wan全培养基终止,传代比例以1:3-1:5为宜。特别注意:该细胞易聚团生长,传代时需充分吹打制成单细胞悬液;长期培养需定期通过吞噬实验验证功能活性,避免功能表型丢失。
研究应用中,RAW 264.7细胞的价值具有鲜明针对性。炎症机制研究中,其可诱导活化特性用于解析TLR4/NF-κB信号通路在LPS介导的炎症反应中的调控作用,探究炎症因子的转录调控机制及抗炎药物的作用靶点;病原体感染研究领域,该细胞系对结核分枝杆菌、金黄se葡萄球菌、新guan病du等多种病原体敏感,可用于构建感染模型,解析病原体的致病机制及宿主的抗感染免疫应答;免yi治疗研究方面,可作为肿瘤相关巨噬细胞(TAM)的替代模型,用于筛选调控巨噬细胞极化的药物,评估其对肿瘤免疫微环境的改善效果;此外,在药理学筛选中,RAW 264.7细胞是抗炎药物、免疫调节剂的核心筛选平台,可通过ELISA检测炎症因子分泌量、流式细胞术分析表型变化评估药物活性。
需注意的是,RAW 264.7细胞为肿瘤源性细胞,其活化特性与正常巨噬细胞存在差异,实验结论需结合原代巨噬细胞验证;不同培养代次的细胞吞噬能力及炎症应答强度可能波动,需选用低代次细胞开展关键实验。但凭借稳定的巨噬细胞功能、旺盛的增殖活性及对刺激的高应答性,RAW 264.7细胞已成为巨噬细胞相关研究的标gan细胞系,为免疫机制解析、疾病模型构建及药物研发提供关键实验支撑。
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