MPC-11小鼠浆细胞

MPC-11小鼠浆细胞，MPC-11 是从 BALB/c 小鼠自发形成的浆细胞瘤中分离纯化并建立的永生化浆细胞系，因精准复刻体内成熟浆细胞的核心特征 —— 具典型浆细胞形态、稳定分泌免疫球蛋白且保留浆细胞te有的功能调控机制，同时携带肿瘤细胞的恶性生物学行为，成为研究浆细胞分化发育、免疫球蛋白合成分泌及浆细胞相关疾?。ㄈ缍喾⑿怨撬枇觯┑暮诵氖笛槟Ｐ停馕鼋赴镅Чδ苡氩±砘铺峁┝吮曜蓟ぞ?。

一、核心生物学特性

MPC-11 细胞具成熟浆细胞的典型形态，在倒置显微镜下观察为圆形或类圆形，细胞质丰富且呈嗜碱性（因胞内富含粗面内质网，为免疫球蛋白合成提供充足场所），细胞核呈圆形或椭圆形、偏居于细胞一侧（即 “偏位核"，浆细胞标志性形态），核仁清晰可见（1-2 个），核质比显著高于未成熟 B 细胞。该细胞稳定表达浆细胞特异性标志物：CD138（ Syndecan-1，浆细胞表面核心标志物，参与细胞黏附与免疫球蛋白分泌调控）、BCMA（ B 细胞成熟抗原，介导浆细胞存活信号的关键受体）、IRF4（干扰素调节因子 4，调控浆细胞分化与功能维持的核心转录因子）；同时不表达 B 细胞早期标志物 CD19、CD20 及 T 细胞标志物 CD3，仅表达免疫球蛋白 IgG2b 的重链与轻链，确保其浆细胞的纯度与功能特异性。

MPC-11 细胞最核心的功能是稳定分泌 IgG2b 型免疫球蛋白—— 在标准培养条件下，细胞可持续分泌 IgG2b，分泌量约为 5-10μg/10?细胞 / 24 小时，通过 ELISA、免疫印迹法可便捷检测上清液中的抗体含量，且分泌功能在传代过程中保持稳定，这一特性使其成为研究免疫球蛋白合成、加工及分泌机制的理想模型。此外，细胞虽源自浆细胞瘤，但保留了部分正常浆细胞的功能调控特性：如 IL-6（浆细胞存活关键细胞因子）可显著促进其增殖活性与抗体分泌量，而 BCMA 抗体可阻断存活信号，导致细胞凋亡率升高，模拟正常浆细胞的信号依赖存活机制；同时，细胞具肿瘤细胞的恶性特征，如无限增殖能力（种群倍增时间约 24-36 小时）、锚着非依赖性生长（可在软琼脂中形成集落）及体内致瘤性（接种裸鼠可形成实体瘤），兼顾浆细胞功能研究与肿瘤机制探索的双重需求。

MPC-11 细胞为wan全悬浮生长细胞系，无需依赖基质贴附，细胞均匀分散于培养基中，少量细胞可能形成松散小聚团（直径≤5 个细胞，不影响活性）。在标准培养条件下，细胞密度达到 2×10?-5×10?个 /mL 时进入对数生长期，此时细胞形态均一、代谢活跃、IgG2b 分泌量最高，是开展药物处理、基因编辑、信号通路研究的最佳时期；若细胞密度过高（超过 2×10?个 /mL），易出现营养竞争加剧、乳酸等代谢废物堆积，导致细胞活力下降（活率低于 80%）、抗体分泌减少，因此需及时传代，传代比例以 1:3-1:5 为宜，每 2-3 天传代一次，维持细胞稳定状态。

二、主要研究应用场景

MPC-11 细胞是解析浆细胞分化、免疫球蛋白合成分泌机制的核心工具。例如，通过 CRISPR/Cas9 技术敲除细胞中的 IRF4 基因，可观察到 CD138、BCMA 等浆细胞标志物表达下降 80% 以上，IgG2b 分泌量减少 90%，明确 IRF4 在浆细胞成熟与功能维持中的 “开关" 作用；利用该细胞研究免疫球蛋白的内质网加工过程，发现当加入内质网应激抑制剂（如 4-PBA）时，未正确折叠的 IgG2b 降解减少，细胞内抗体聚集量降低，揭示浆细胞通过内质网应激通路维持抗体合成稳态的机制。此外，细胞也用于浆细胞存活信号通路研究，如验证 IL-6/JAK/STAT3 通路对浆细胞增殖的调控 —— 阻断 JAK2 后，细胞增殖速率下降 50%，凋亡率升高 30%，为理解浆细胞在免疫应答中的长期存活机制提供实验依据。

MPC-11 细胞因与多发性骨髓瘤细胞（浆细胞来源恶性肿瘤）的生物学特性高度相似，广泛应用于该疾病的病理机制研究与药物研发。在病理机制探索中，用多发性骨髓瘤患者骨髓微环境中的细胞因子（如 IL-6、TNF-α）处理细胞，可模拟疾病微环境对浆细胞的影响，观察到细胞抗凋亡蛋白 Bcl-2 表达上调，对hua疗药物敏感性下降，揭示微环境在骨髓瘤耐药中的作用；通过高通量测序对比 MPC-11 细胞与正常浆细胞的基因差异，可筛选出 MYC、CCND1 等骨髓瘤相关致癌基因，为疾病诊断标志物开发提供靶点。在药物筛选中，通过 CCK-8 法检测候选药物对细胞增殖的抑制效果，计算 IC50 值评估活性；针对 BCMA 靶点的 CAR-T 细胞或抗体药物偶联物（ADC），可在 MPC-11 细胞模型中验证杀伤效果（如流式细胞术检测凋亡率），为药物临床转化提供关键数据，尤其在靶向浆细胞肿瘤的药物研发中应用广泛。

MPC-11 细胞稳定分泌 IgG2b 的特性，使其在免疫学实验中具重要应用价值：一是作为阳性对照细胞，用于流式细胞术检测浆细胞标志物（如 CD138）、ELISA 检测 IgG2b 抗体的实验体系验证，确保检测方法的准确性；二是用于抗体纯化与应用，收集细胞培养上清，经蛋白 A/G 亲和层析可获得高纯度 IgG2b 抗体，用于免疫印迹、免疫组化等实验的二抗或对照抗体，降低商业抗体的使用成本；三是用于抗体工程研究，通过基因改造使细胞分泌嵌合抗体或双特异性抗体，探索抗体结构与功能的关系，为抗体药物开发提供前期实验基础。

三、细胞培养关键要点

MPC-11 细胞常规使用 RPMI-1640 培养基培养，该培养基含浆细胞生长所需的必需氨基酸、维生素及微量元素，可满足细胞增殖与抗体分泌需求；需添加 10%-15% 胎牛血清（FBS，选择低内毒素批次，避免刺激细胞过度活化）、1% 谷an酰胺（维持细胞内质网功能与蛋白合成）、1% 抗菌制剂（预防细菌污染）。培养基 pH 需严格控制在 7.2-7.4，使用前在 37℃水浴锅中预热至室温，避免低温刺激导致细胞应激，影响 IgG2b 分泌与增殖活性。

细胞需置于 37℃、5% CO?、湿度 95% 以上的恒温培养箱中培养：37℃为细胞代谢与酶活性的最适温度，可维持免疫球蛋白合成相关酶（如内质网折叠酶）的活性；5% CO?通过调节培养基中碳酸氢盐平衡维持 pH 稳定，避免 pH 异常导致细胞形态改变；95% 湿度可防止培养基过度蒸发，避免渗透压升高导致细胞脱水。培养过程中需每天观察细胞状态，轻轻摇晃培养瓶使细胞均匀分布，避免细胞沉降导致局部密度过高；通过台盼蓝染色法每周检测 1-2 次细胞活力，确?；盥饰衷?85% 以上。

传代时，将培养瓶中的细胞悬液轻轻吹打均匀（力度需轻柔，避免损伤细胞表面 CD138），按 1:3-1:5 比例转移至新培养瓶，加入新鲜培养基后放回培养箱（悬浮细胞无需消化，直接分装即可）。

冻存需选用对数生长期且活力良好的细胞（活率≥90%），冻存液为 90% FBS+10% DMSO（DMSO 可降低细胞内冰晶形成，减少冻存损伤）；将细胞悬液与冻存液按 1:1 混合均匀，分装至冻存管并标注信息；遵循梯度降温程序：4℃放置 30 分钟→-20℃放置 1 小时→-80℃过夜→转入液氮长期保存。复苏时，冻存管从液氮取出后快速放入 37℃水浴融化（时间不超过 1 分钟），加入 5 倍体积预热培养基，1000rpm 离心 5 分钟去除 DMSO（DMSO 对细胞有一定毒性）；弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞后接种，复苏后 24 小时内不换液，提高细胞存活率。

四、实验使用注意事项