SRA01/04（HLE）人晶体上皮细胞永生系

SRA01/04（HLE）人晶体上皮细胞永生系，是通过体外永生化技术对人晶状体前囊膜上皮细胞（Human Lens Epithelial Cells，HLE）进行改造获得的特殊细胞模型。其以稳定保留正常晶状体上皮细胞核心功能为基础，凭借无限增殖能力克服原代细胞传代瓶颈，成为眼科领域白内障机制研究、晶状体再生探索及眼科药物研发的核心工具，被全球科研机构广泛应用于晶状体生理功能解析与眼部疾病转化研究。

该永生系的构建源于对原代人晶状体上皮细胞局限性的突破 —— 原代细胞因端粒酶活性随传代逐渐降低，通常仅能传 3-5 代便进入衰老期，难以满足长期实验需求。SRA01/04（HLE）通过导入外源性永生化基因（如猿猴病毒 40 大 T 抗原），激活端粒酶活性并稳定染色体结构，实现传代 100 代以上仍保持一致生长特性，且经软琼脂克隆形成实验、裸鼠致瘤性检测验证，无恶性转化风险，兼顾 “永生增殖" 与 “功能保真" 双重优势。

从生物学特性来看，SRA01/04（HLE）呈典型贴壁生长，显微镜下以上皮样多边形细胞为主，边界清晰，紧密排列时形成 “铺路石样" 单层结构，wan美复刻体内晶状体前囊膜上皮的单层立方排列形态。细胞间存在发达的紧密连接与缝隙连接，保障晶状体上皮te有的屏障功能与细胞间信号传递；胞质丰富且呈淡嗜酸性，高尔基体与内质网发达（支撑晶体蛋白合成分泌），部分细胞可见细小透明颗粒（晶体蛋白储存特征）；细胞核位于细胞中央，呈圆形或椭圆形，核仁清晰，染色质均匀分布，核质比约 1:3.5，与正常晶状体上皮细胞高度一致。其核心功能优势体现在特异性标志物高表达与生理功能完整：免疫检测显示，细胞高表达晶状体上皮特异性晶体蛋白 αA（阳性率＞95%）、αB（阳性率＞90%），同时表达上皮极性蛋白 ZO-1、E - 钙粘蛋白；功能上，Na?/K?-ATP 酶活性正常（维持晶状体渗透压平衡，保障透明性），且能通过表达谷胱gan肽过氧化物酶抵御氧化损伤，与原代细胞功能无显著差异。

细胞培养操作需围绕 “维持永生系稳定性与功能完整性" 展开。适宜环境为 37℃、5% CO?恒温培养箱，培养基优先选择含 10% 低内毒素胎牛血清的 DMEM/F12 混合液 —— 该配方含丰富氨基酸与微量元素，可支撑上皮细胞极性维持与晶体蛋白合成；需额外添加 5ng/mL 表皮生长因子（EGF，促进增殖并稳定分化表型）与 0.1mmol/L 抗坏血酸（模拟晶状体腔内抗氧化微环境），避免内毒素引发细胞炎症或晶体蛋白异常聚集。日常培养中，每 2-3 天更换新鲜培养基以补充活性因子；传代时机为细胞融合度 80%-85%（避免过度密集导致接触抑制），操作时先用 37℃预热 PBS 清洗 2 次，加入消化液孵育 3-5 分钟（因细胞贴壁牢固，需控制消化时间防损伤），待细胞间隙增大后终止消化，轻轻吹打为单细胞悬液，按 1:3-1:4 比例接种，确保接种密度 4×10?-6×10? cells/cm2（密度过低易致生长缓慢，过高影响晶体蛋白表达）。

科研应用中，SRA01/04（HLE）永生系的价值贯穿眼科研究多方向。在白内障机制研究中，可作为标准化正常对照，与氧化损伤模型、遗传性白内障致病基因（如 CRYAA 突变）过表达模型对比，分析晶体蛋白聚集、氧化应激水平（ROS、谷胱gan肽浓度）差异，揭示疾病发生分子机制；其永生特性还支持长期追踪实验，如观察慢性氧化损伤对细胞功能的渐进影响。在晶状体损伤修复研究中，通过机械划伤构建损伤模型，可长期监测细胞增殖、迁移及分化动态，评估 EGF、bFGF 等生长因子的调控作用，为晶状体再生治疗（如人工jing状体联合细胞移植）提供数据支撑。在眼科药物研发领域，既能用于抗白内障药物筛选（检测药物对晶体蛋白聚集的抑制效果、对细胞抗氧化能力的提升作用），也可开展药物毒性评估（通过 CCK-8 法检测细胞活力，结合晶体蛋白表达变化判断安全性）；同时，与人工jing状体材料共培养，可评估材料生物相容性，为晶状体设计优化提供依据。