Raji人Burkitt's淋巴瘤细胞

Raji人Burkitt's淋巴瘤细胞是研究 Burkitt's 淋巴瘤及 EB 病毒（EBV）相关肿瘤的经典体外模型，源自非洲 Burkitt's 淋巴瘤患者的肿瘤组织，因稳定携带 EBV 基因组且保留 Burkitt's 淋巴瘤的核心生物学特征，在肿瘤发病机制、病毒 - 宿主相互作用及靶向药物筛选领域应用广泛，为解析 B 细胞恶性肿瘤与病毒关联机制提供关键实验载体。

一、核心生物学特性

细胞来源上，该细胞系分离自 EBV 阳性的 Burkitt's 淋巴瘤患者，经体外培养建系后，持续携带 EBV 潜伏感染状态的基因组，且 EBV 基因（如 EBNA-1、LMP-1）呈稳定表达，这一特性使其成为研究 EBV 致瘤机制的核心模型。形态上，Raji 细胞呈圆形或椭圆形，以悬浮生长为主，部分细胞轻微聚团，胞质少而透明，细胞核大且核仁明显，染色质呈粗颗粒状，符合 Burkitt's 淋巴瘤细胞 “星空状" 核型的典型形态特征 —— 因部分细胞凋亡形成的空泡与密集的细胞核交织，在显微镜下呈现类似星空的视觉效果。

功能特性方面，Raji 细胞具备 Burkitt's 淋巴瘤的恶性生物学行为，如ji强的增殖能力，细胞周期短（约 24-30 小时），S 期细胞占比显著高于正常 B 细胞，体外培养时 2-3 天即可达到对数生长期高密度；同时具有 EBV 相关的独特功能，如 EBV 基因组可通过调控 Bcl-2 家族蛋白表达，抑制细胞凋亡通路激活，使细胞对凋亡诱导药物的敏感性降低，模拟体内 EBV 阳性 Burkitt's 淋巴瘤的耐药特性。此外，细胞稳定表达 B 细胞特异性标志物（CD19、CD20、CD22）及 EBV 相关抗原（EBNA-1），且能持续分泌免疫球蛋白 M（IgM），这些特征不仅为细胞鉴定提供明确依据，也为 EBV 相关抗原检测、靶向治疗实验搭建关键平台。

二、体外培养关键条件

基础培养基选择以 RPMI-1640 为主，需添加 10%-12% 胎牛血清以满足细胞生长对营养因子（如氨基酸、生长激素）的需求，血清需经过 56℃、30 分钟热灭活处理，破坏补体成分避免其对细胞活性产生抑制，同时加入 1% 无菌防护试剂预防细菌污染。培养基 pH 需通过 NaHCO?调节至 7.2-7.4，渗透压控制在 280-320mOsm/kg，可额外添加 10mM HEPES 缓冲液增强 pH 稳定性，避免培养过程中 pH 波动影响细胞代谢。

培养环境需严格控制为 37℃、5% CO?的恒温恒湿条件，培养箱内湿度保持在 95% 以上，防止培养基因水分蒸发导致渗透压升高。因细胞以悬浮生长为主，传代操作无需消化试剂，直接收集对数生长期的细胞悬液，按 1:4-1:6 的比例接种至新鲜培养基中即可，传代周期通常为 2-3 天。需注意细胞密度需维持在 5×10?-2×10?个 /mL，密度过高易导致营养竞争激烈、代谢废物积累，引发细胞活力下降；密度过低则会因细胞间信号传递不足，减缓增殖速度。

细胞维护过程中，每日需通过倒置显微镜观察细胞状态：若发现细胞聚团直径超过 10 个细胞、胞质内出现大量颗粒或培养基呈现浑浊状，可能提示细胞活力下降或污染，需及时更换培养基或进行无菌检测；细胞冻存时，需使用含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的胎牛血清作为冻存液，采用梯度降温法（4℃放置 30 分钟→-20℃放置 1 小时→-80℃过夜→转入液氮长期保存），减少冰晶形成对细胞的损伤；复苏时需将冻存管快速放入 37℃水浴中 1-2 分钟解冻，立即加入 10 倍体积的培养基稀释，降低 DMSO 毒性，提高复苏存活率。

三、主要实验应用场景

在 EBV 相关 Burkitt's 淋巴瘤机制研究中，Raji 细胞是核心实验模型?？蒲腥嗽笨赏ü?RNA 干扰、CRISPR-Cas9 等技术干扰 EBV 关键基因（如 EBNA-1、LMP-1）的表达，观察细胞增殖、凋亡及迁移能力的变化，明确 EBV 基因在肿瘤发生发展中的调控作用；也可通过转录组测序、蛋白质组学分析，筛选 EBV 基因组调控的下游靶基因（如 MYC、BCL-6），解析 EBV 致瘤的分子通路，为 EBV 相关 Burkitt's 淋巴瘤的防治提供理论支撑。

药物研发领域，Raji 细胞应用广泛。可将不同浓度的 Burkitt's 淋巴瘤治疗药物作用于细胞，通过 MTT 法、CCK-8 法检测细胞活力，计算半数抑制浓度（IC50），评估药物对肿瘤细胞的杀伤效果；也可针对 EBV 靶向药物（如 EBNA-1 小分子抑制剂、LMP-1 抗体）开展筛选实验，检测药物对 EBV 基因表达、细胞存活的影响，为 Burkitt's 淋巴瘤精准治疗药物研发提供数据支持。

在免疫学研究中，Raji 细胞可用于抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）实验。因细胞高表达 CD20 分子，常作为 CD20 单克隆抗体的靶细胞，与 NK 细胞、巨噬细胞等免疫细胞共培养后，通过检测乳酸脱氢酶（LDH）释放量或荧光标记法，评估免疫细胞对靶细胞的杀伤效率，为抗体药物的效果验证提供实验依据；同时，细胞分泌的 IgM 可用于免疫球蛋白的功能研究，也可作为标准品用于抗体检测方法（如 ELISA）的建立与优化。

四、实验应用注意事项

实验前需通过流式细胞术验证细胞表面标志物（CD19、CD20、EBNA-1）的表达水平及 EBV 感染状态，确保细胞特性稳定，避免因细胞传代次数过多（通常建议传代不超过 30 代）导致 EBV 基因丢失或表型改变，影响实验结果的可靠性；不同批次的胎牛血清成分存在差异，可能对细胞 EBV 基因表达、增殖速度产生影响，建议固定血清品牌，并通过预实验验证其适用性。

操作过程中需严格遵守无菌规范，悬浮细胞对支原体污染更为敏感，每培养 3 代需通过 PCR 法或支原体检测试剂盒检测细胞是否存在支原体污染，若发现污染需立即丢弃受污染细胞，避免交叉感染影响其他细胞株；传代时需轻柔吹打细胞悬液，避免剧烈操作导致细胞破裂，影响后续的流式检测、蛋白提取等实验结果。

结果解读需结合细胞的 EBV 携带特性，Raji 细胞因稳定携带 EBV 基因组，其生物学行为与 EBV 阴性 Burkitt's 淋巴瘤细胞（如 Daudi 细胞）存在差异，实验结论不可直接推广至所有 Burkitt's 淋巴瘤模型，需结合 EBV 阴性细胞系或临床患者样本数据进行综合分析，确保研究结果的全面性与临床相关性。