WEHI-3小鼠血细胞

WEHI-3小鼠血细胞是体外研究小鼠造血系统生理功能、血液疾病机制及药物筛选的重要细胞模型，源自小鼠骨髓造血组织，经体外分离培养与鉴定后，保留了造血细胞的核心生物学特性，兼具造血细胞的增殖活性与分化潜能，为血液学基础研究、白血病发病机制解析及抗肿瘤药物研发提供了可靠实验材料，在小鼠造血系统相关研究中应用广泛且科研价值突出。

从细胞来源与生物学特性来看，该细胞分离自正常小鼠的骨髓组织，骨髓作为机体主要的造血器官，是各类血细胞（红细胞、白细胞、血小板等）的生成场所，而 WEHI-3 细胞高度还原了骨髓造血细胞的生理属性。在形态上，WEHI-3 小鼠血细胞呈圆形或椭圆形，胞体大小较均匀，细胞核大而圆，占细胞体积的大部分，核仁清晰可见，染色质呈细颗粒状均匀分布，细胞质少而呈淡蓝色，体外培养时以悬浮生长为主，偶见少量细胞聚集形成松散的小团块，这一形态特征与体内骨髓造血细胞的形态高度一致，便于通过光学显微镜观察判断细胞生长状态与活性。在细胞类型属性方面，WEHI-3 细胞属于小鼠髓系造血细胞，可定向分化为粒细胞、单核细胞等髓系细胞，通过特定诱导条件（如加入粒细胞集落刺激因子 G-CSF、单核细胞集落刺激因子 M-CSF）可促进其向成熟髓系细胞分化，分化过程中会表达相应的细胞表面标志物，如粒细胞特异性标志物 Gr-1、单核细胞特异性标志物 CD11b 等，通过流式细胞术可检测这些标志物的表达变化，明确细胞分化方向与程度，为研究造血细胞分化调控机制提供了理想模型。此外，该细胞还具备稳定的增殖能力，在适宜培养条件下可长期悬浮生长，传代过程中细胞形态与生物学特性不易发生改变，且无明显恶性转化特征，核型稳定，这一特性使其能够满足长期实验研究的需求，保证实验结果的重复性与可靠性。

在培养条件与操作要点方面，WEHI-3 小鼠血细胞对培养环境要求较为精细，需模拟骨髓造血微环境的营养与理化条件。培养基推荐使用含 10%-15% 胎牛血清（FBS）的 RPMI-1640 培养基，该培养基含丰富的氨基酸、维生素、核苷酸及微量元素，能满足悬浮造血细胞的能量与营养需求，胎牛血清可提供造血生长因子（如 IL-3、GM-CSF）、细胞因子及黏附蛋白，促进细胞活性维持与增殖；培养环境需严格控制在 37℃、5% CO?的恒温培养箱中，CO?浓度可稳定培养基 pH 值在 7.2-7.4 的适宜范围，避免 pH 波动影响细胞代谢与造血功能。传代操作时，因细胞呈悬浮生长，无需胰dan白酶消化处理，当细胞密度达到 1×10?-2×10?个 /mL、培养基出现轻微浑浊时，直接按 1:2-1:4 的比例将细胞悬液接种至新鲜预热的培养基中即可，传代间隔通常为 2-3 天，需避免细胞密度过高导致营养耗尽或代谢废物（如乳酸、氨）积累，引发细胞凋亡。培养过程中需密切观察细胞形态，若出现大量细胞皱缩、细胞核固缩、碎片增多等现象，需及时排查污染（如细菌、真菌、支原体）或培养基质量问题；同时需严格遵守无菌操作规范，所有操作均在超净工作台内进行，培养基、磷酸盐缓冲液（PBS）等试剂使用前需经 0.22μm 滤膜过滤除菌，细胞培养过程中每 1-2 周进行支原体检测（常用 PCR 法或酶联免疫法），确保细胞培养稳定性。在细胞冻存与复苏方面，冻存液建议使用含 10% 二甲基亚砜（DMSO）、20% 胎牛血清的 RPMI-1640 培养基，将细胞浓度调整为 2×10?-5×10?个 /mL，按梯度降温法处理：4℃放置 30 分钟→-20℃放置 1 小时→-80℃过夜，次日转入液氮长期保存，可最da程度减少低温对细胞的损伤；复苏时需将冻存管迅速放入 37℃水浴锅，持续轻轻摇晃至细胞悬液wan全融化（约 1-2 分钟），立即加入 5-10 倍体积的新鲜培养基稀释 DMSO，1000rpm 离心 5 分钟后弃上清，用新鲜培养基重悬细胞接种，复苏后 24 小时内观察细胞存活率（通常要求≥70%），确保细胞后续实验可用性。

在功能特点与科研应用领域，WEHI-3 小鼠血细胞凭借其贴近生理状态的造血细胞特性，被广泛应用于造血机制研究、血液疾病模型构建、抗肿瘤药物筛选及造血生长因子功能验证等方面。在造血机制研究中，该细胞是解析髓系造血细胞增殖与分化调控机制的重要工具，研究人员可通过加入不同的造血生长因子或信号通路抑制剂，观察细胞增殖速率（如 MTT 法、CFSE 染色法检测）、分化标志物表达变化（如流式细胞术检测），解析 IL-3/GM-CSF 信号通路、JAK-STAT 信号通路等在髓系造血细胞发育中的调控作用，明确造血微环境中细胞因子对造血细胞命运的影响，为理解机体正常造血过程提供实验依据。

在血液疾病模型构建方面，WEHI-3 细胞可用于构建小鼠髓系白血病模型，通过基因编辑技术（如 CRISPR-Cas9）敲除抑癌基因（如 p53）或过表达致癌基因（如 MYC），诱导细胞发生恶性转化，模拟髓系白血病细胞的异常增殖、分化障碍特征，进而研究白血病的发病机制。例如，通过构建 p53 基因敲除的 WEHI-3 细胞模型，观察细胞增殖失控、凋亡抵抗现象，检测白血病相关基因（如 BCR-ABL、FLT3）的表达变化，解析抑癌基因缺失在白血病发生中的作用，为寻找白血病治疗靶点提供实验支撑。在抗肿瘤药物筛选方面，WEHI-3 细胞可用于针对髓系白血病的药物体外活性评价，涵盖hua疗药物、靶向药物及新型免yi治疗药物。通过 MTT 法、CCK-8 法检测药物对细胞增殖的抑制率，流式细胞术检测药物诱导的细胞凋亡率（如 Annexin V/PI 双染），Western blot 检测药物对白血病相关信号通路（如 PI3K-AKT、MAPK）的影响，可快速筛选出具有潜在活性的药物；同时可利用该细胞构建药物耐药模型（如长期低剂量药物诱导），研究耐药相关基因（如 ABC 转运蛋白家族、DNA 修复基因）的表达变化，解析耐药机制，为逆转白血病耐药提供新策略。

在造血生长因子功能验证方面，WEHI-3 细胞对多种造血生长因子（如 IL-3、GM-CSF、G-CSF）具有敏感性，可用于验证这些生长因子的生物学功能。例如，通过将重组 GM-CSF 与 WEHI-3 细胞共培养，观察细胞增殖活性增强及向单核 - 巨噬细胞分化的现象，检测细胞表面 CD11b 标志物表达升高，验证 GM-CSF 对髓系造血细胞的促增殖与促分化功能，为造血生长因子的临床应用（如肿瘤放hua疗后造血功能恢复）提供实验依据。此外，在免疫相关研究中，WEHI-3 细胞分化产生的单核细胞、粒细胞可用于研究固有免疫应答机制，如检测这些细胞对细菌脂多糖（LPS）的反应，观察炎症因子（如 IL-6、TNF-α）的分泌变化，解析固有免疫细胞在抗感染免疫中的作用。

综上所述，WEHI-3 小鼠血细胞凭借其稳定的造血细胞特性、明确的功能定位及便捷的培养操作，成为小鼠造血系统研究领域的重要工具，为推动造血机制解析、血液疾病模型构建、抗肿瘤药物研发及造血生长因子功能验证发挥关键作用，未来在小鼠血液学精准研究中仍具有广阔的应用前景。