RSC-96大鼠雪旺细胞

RSC-96大鼠雪旺细胞是周围神经生物学研究的核心细胞模型，源自新生大鼠坐骨神经的原代雪旺细胞，经纯化与永生化处理建立。作为模拟体内雪旺细胞生理功能的 “黄金标准" 之一，它不仅保留了正常雪旺细胞的形态特征与核心功能，还解决了原代雪旺细胞增殖能力弱、传代受限的难题，能在体外长期稳定传代并维持功能特性，成为研究周围神经发育、损伤修复及神经退行性疾病的关键工具，尤其在细胞治疗与药物筛选领域应用广泛。

从生物学特性来看，RSC-96 细胞呈现典型的雪旺细胞形态与功能标识。光学显微镜下，细胞呈长梭形或纺锤形，胞体两端延伸出细长突起，排列时呈平行状或漩涡状，与体内包裹神经轴突的雪旺细胞形态高度一致；细胞核为椭圆形，位于细胞中央，染色质均匀分布，核仁清晰，无明显核异型性，体现正常功能细胞的核特征。功能层面，其核心价值在于两大关键能力：一是神经营养支持功能—— 能持续分泌神经生长因子（NGF）、脑源性神经营养因子（BDNF）等多种因子，这些因子可促进神经元存活、诱导轴突生长，模拟体内雪旺细胞对神经纤维的营养保障作用；二是髓鞘形成潜力—— 在 forskolin（ forskolin ）或与神经元共培养的诱导条件下，细胞可高表达髓鞘碱性蛋白（MBP）、髓鞘蛋白零（P0）等髓鞘相关蛋白，并能包裹神经元轴突形成类髓鞘结构，复现神经信号传导的结构基础。生长特性上，细胞为贴壁依赖性生长，最适环境为 37℃、5% CO?恒温恒湿，pH 维持 7.2-7.4；倍增时间约 48-60 小时，对数期细胞密度可达 3×10?-5×10?个 /cm2，且具备轻度接触抑制，融合度达 85% 后增殖减缓，避免过度生长导致的功能紊乱。

在培养操作与质量控制上，需围绕 “维持雪旺细胞特异性功能" 设计流程。培养基shou选含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合液，并添加 2μM forskolin 与 10ng/mL Heregulin-β1——forskolin 可激活 cAMP 信号通路，维持细胞梭形形态与髓鞘蛋白表达；Heregulin-β1 能促进增殖并增强神经营养因子分泌，缺失则易导致细胞扁平纤维化。培养皿需经多聚赖氨酸包被以增强贴壁能力，传代时用无菌 PBS 冲洗 2 次后，加入 0.25% 消化液孵育 3-4 分钟，待细胞边缘收缩后，立即用含血清培养基终止消化，轻柔吹打形成单细胞悬液，按 1:3-1:5 比例接种，24 小时内完成贴壁。质量控制需多维度验证：台盼蓝染色确保细胞活力≥85%；免疫组化检测 S-100 蛋白、GFAP（胶质纤维酸性蛋白）阳性率≥95%，确认细胞纯度；ELISA 检测 NGF、BDNF 分泌量，保证功能稳定；髓鞘相关研究需通过 Western blot 验证 MBP 表达，或共培养观察类髓鞘结构。

科研应用中，RSC-96 细胞在神经领域发挥不可替代的作用。周围神经损伤修复研究中，可通过缺氧、机械划伤构建损伤模型，观察细胞迁移、增殖及神经营养因子分泌变化，评估中药提取物、生长因子等干预措施的修复效果；与 DRG（背根神经节）神经元共培养时，能直观观察轴突生长长度与髓鞘包裹情况，为细胞治疗方案（如雪旺细胞移植）提供数据支撑。神经退行性疾病机制解析方面，构建高糖诱导模型模拟糖尿病周围神jing病变，可检测细胞氧化应激水平、线粒体功能及信号通路（PI3K/Akt、MAPK）变化，明确雪旺细胞功能异常的分子机制；针对 Charcot-Marie-Tooth 病等遗传性神经疾病，通过导入突变基因，研究髓鞘形成障碍的原因。神经材料相容性评价中，将细胞接种于神经支架材料表面，检测黏附率、增殖曲线及功能维持状态，筛选适合体内移植的生物材料。此外，还可用于神经营养因子调控药物筛选，通过检测药物对细胞分泌功能的影响，发现辅助神经修复的候选化合物。

不过，该细胞系存在局限性：作为大鼠来源细胞，与人类雪旺细胞在神经营养因子分泌谱、药物敏感性上存在物种差异，临床转化需结合人类原代细胞验证；体外环境缺乏体内神经微环境的复杂性（如神经束膜、免疫细胞相互作用），类髓鞘结构与天然髓鞘的传导功能仍有差距；长期传代（＞30 代）可能出现 MBP 表达下降等功能漂移，需冻存早期传代细胞（P5-P10），实验前验证功能稳定性。