RL95-2人子宫内膜腺癌细胞

RL95-2人子宫内膜腺癌细胞是妇科肿瘤研究领域的经典细胞模型，源自 65 岁女性子宫内膜腺癌患者的肿瘤组织，经原代分离、体外培养与克隆筛选建立。作为保留子宫内膜腺癌核心生物学特征的细胞系，它不仅具备上皮样肿瘤细胞的形态与恶性增殖特性，更因稳定表达雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR），且能对激素信号产生应答，成为研究激素依赖性子宫内膜癌发病机制、激素调控网络及抗肿瘤药物筛选的理想工具，广泛应用于妇科肿瘤学基础研究、内分泌治疗策略优化及药物研发等领域。

从生物学特性来看，RL95-2 细胞呈现鲜明的子宫内膜腺癌细胞形态与功能特征。光学显微镜下，细胞呈多边形或立方形的上皮样形态，贴壁生长时排列紧密且具有一定极性，部分区域形成腺样结构（模拟体内子宫内膜腺体形态），体现腺癌的组织学特征；胞质丰富，偶见细小分泌颗粒，细胞核呈圆形或椭圆形，位于细胞中央，染色质分布不均，核仁明显（多为 1-2 个），偶见双核细胞，核异型性程度符合中分化子宫内膜腺癌的病理特征。功能层面，该细胞的核心优势在于两大关键属性：一是激素应答能力，细胞表面高表达 ERα、PR，在雌激素（如 17β- 雌二醇）刺激下可加速增殖，在孕激素（如孕酮）作用下则增殖受抑，wan美复现临床激素依赖性子宫内膜癌的激素调控特征；二是分泌功能，能合成并分泌黏蛋白（如 MUC1）、细胞因子（如 IL-6、VEGF），其中黏蛋白的分泌与肿瘤细胞的侵袭、免疫逃逸相关，细胞因子则参与肿瘤微环境的调控，为研究肿瘤进展机制提供依据。生长特性上，RL95-2 细胞为贴壁依赖性生长，最适培养条件为 37℃、5% CO?恒温恒湿环境，pH 维持在 7.2-7.4；增殖速率中等，倍增时间约为 50-72 小时，对数生长期细胞密度可达 2×10?-4×10?个 /cm2，且具有轻度接触抑制特性，当细胞融合度达到 85% 以上时需及时传代，避免细胞堆积导致功能退化。

在培养操作与质量控制层面，RL95-2 细胞的培养需重点关注 “维持激素受体表达与激素应答能力"，避免因培养条件不当导致细胞表型漂移。培养基选择上，常规使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合培养基（比例 1:1），血清需经过支原体检测与激素含量筛查（选择低激素水平血清），防止外源性激素干扰细胞的激素应答实验；若需开展激素调控相关研究，需使用无酚红、去激素血清的培养基，并添加胰岛素（5μg/mL）、转铁蛋白（5μg/mL）维持细胞代谢，确保实验结果的准确性。培养操作时，需使用经胶原 IV 包被的培养皿，增强细胞贴壁能力与腺样结构形成效率，避免因贴壁不良导致细胞形态异常；传代流程需精准控制：先用无菌 PBS 缓冲液轻柔冲洗细胞表面 2-3 次，去除残留培养基，加入 0.25% 的细胞消化液（含 EDTA），37℃孵育 4-6 分钟，待细胞边缘收缩、间隙增大但未wan全脱落时，立即加入含血清的培养基终止消化，用移液器轻柔吹打形成单细胞悬液（避免过度吹打破坏腺样结构），按 1:2-1:3 的比例接种至新培养皿，24-48 小时内即可完成贴壁与增殖启动。质量控制方面，需定期开展多维度检测：通过台盼蓝染色确保细胞活力≥85%；通过免疫细胞化学染色或流式细胞术验证 ERα、PR 阳性表达率（需≥80%），确认激素受体表达稳定；通过 CCK-8 法检测细胞在雌激素 / 孕激素处理后的增殖变化，验证激素应答能力；若用于分泌功能研究，还需通过 ELISA 检测黏蛋白或细胞因子分泌量，确保细胞功能符合实验要求。

在科研应用领域，RL95-2 细胞凭借 “激素应答稳定 + 功能贴近临床" 的优势，在多个子宫内膜癌研究方向中发挥核心作用。激素依赖性子宫内膜癌发病机制研究是其最核心的应用场景 —— 科研人员可通过调控激素信号（如添加雌激素、抗雌激素药物他mo昔芬），观察细胞增殖、凋亡及相关信号通路（如 PI3K/Akt、MAPK 通路）的活性变化，解析激素驱动肿瘤进展的分子机制；例如，通过基因沉默技术敲低 ERα 后，检测细胞增殖速率与下游靶基因（如 Cyclin D1）的表达变化，明确 ERα 在肿瘤增殖中的关键作用，为理解激素依赖性子宫内膜癌的发病本质提供理论基础。内分泌治疗药物筛选与机制研究方面，RL95-2 细胞是评估药物疗效的关键工具 —— 在新型抗雌激素药物、孕激素类药物研发中，可通过体外梯度给药检测细胞活力、凋亡率及激素受体表达变化，筛选有效药物；同时，可利用该细胞构建内分泌治疗耐药模型（如长期低剂量雌激素诱导），对比敏感株与耐药株的基因表达差异（如 ERβ 上调、PI3K 通路激活），解析耐药机制，为开发耐药逆转策略提供实验依据。肿瘤微环境相互作用研究中，RL95-2 细胞可用于模拟癌细胞与微环境细胞的 “交叉对话"—— 通过构建 Transwell 共培养体系（上室为 RL95-2 细胞，下室为子宫内膜间质细胞、免疫细胞），观察微环境细胞分泌的细胞因子（如 IL-1β、TGF-β）对癌细胞增殖、侵袭及激素受体表达的影响，明确微环境在肿瘤进展与治疗抵抗中的作用，为靶向微环境的联合治疗提供数据支撑。此外，该细胞还可用于子宫内膜癌诊断标志物研究，通过蛋白质组学分析细胞分泌的蛋白或表面表达的分子，筛选潜在的诊断标志物（如特定黏蛋白亚型），助力临床子宫内膜癌的早期诊断与预后评估。

不过，使用 RL95-2 细胞需注意其局限性。该细胞系仅代表激素依赖性、中分化子宫内膜腺癌亚型，无法模拟激素受体阴性、低分化或浆液性子宫内膜癌的生物学特征，研究不同亚型时需搭配对应细胞系（如 KLE 细胞代表激素非依赖性亚型）补充验证。作为单一细胞系，它无法wan全体现临床子宫内膜癌的分子异质性（如患者间基因突变谱、激素受体表达水平差异），实验结果需结合临床肿瘤样本（如组织芯片）进一步验证。此外，长期传代（超过 40 代）可能导致细胞激素受体表达下降（如 ERα 阳性率降低）或激素应答能力减弱，需定期冻存早期传代细胞（如 P5-P10 代），并在实验前通过激素受体检测与功能验证，确保细胞特性稳定，避免因细胞表型改变影响实验结果的可靠性与重复性。