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更新时间:2025-10-15
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大鼠骨骼肌成肌细胞
大鼠骨骼肌成肌细胞是从大鼠骨骼肌组织中分离培养获得的成体干细胞群体,因具备强增殖分化能力、可定向形成肌纤维、与人类骨骼肌成肌细胞生理特性高度相似,成为研究肌肉发育机制、肌损伤修复过程及肌肉相关疾病(如肌wei缩、肌营养不良)的核心模型细胞,在运动医学、再生医学及药理学基础研究中应用广泛,对临床肌肉疾病的治疗探索具有重要参考意义。
从细胞来源与培养特性来看,这类来源于大鼠骨骼肌的成肌细胞,原始组织多取自健康成年或幼年大鼠(常用 SD 大鼠、Wistar 大鼠)的四肢骨骼?。ㄈ珉止乔凹?、腓肠?。?该部位骨骼肌纤维丰富,成肌细胞含量较高且活性强,易通过酶解结合差速贴壁法分离获取。分离过程需先在无菌条件下剥离骨骼肌组织,去除筋膜与脂肪后剪碎为细小组织块,用胶原酶与蛋白酶分步消化破坏肌纤维结构,释放单个成肌细胞;随后通过过滤去除未消化的组织碎片,收集细胞悬液后接种至培养皿,利用成肌细胞贴壁速度较快的特性,结合短期培养去除部分非成肌细胞杂质,最终可获得纯度超过 90% 的骨骼肌成肌细胞。原代培养的细胞约 12-24 小时开始贴壁,初期呈圆形或梭形,随着培养时间延长逐渐增殖形成均一的梭形细胞群落;传代培养时,细胞在增殖期保持稳定分裂能力,传代 5-8 代内仍能维持成肌特性;当细胞密度达到一定程度(约 80%-90% 融合)时,会自发进入分化阶段,逐渐失去增殖能力并向肌管方向分化,因此需在增殖期及时传代以维持细胞活性,降低实验重复性成本。
在形态与生物学功能方面,这类来源于大鼠骨骼肌的成肌细胞呈现典型的成肌细胞特征与功能特异性。显微镜下观察,增殖期细胞呈均一梭形,细胞核大而椭圆,位于细胞中央,细胞质内富含肌动蛋白与肌球蛋白前体,为后续肌纤维形成奠定物质基?。唤敕只诤?,细胞逐渐停止增殖,开始相互融合形成多核肌管,肌管进一步成熟可显现明暗交替的肌横纹,趋近成熟骨骼肌纤维形态。生物学功能上,其核心优势体现在两大方面:一是强大的增殖分化潜能,在适宜培养条件下(如含血清的增殖培养基)可快速增殖,补充成肌细胞库;当培养环境切换为分化培养基(如低血清或无血清培养基)时,能定向分化为肌管,最终形成具有收缩功能的肌纤维,模拟体内肌肉再生过程;二是对肌损伤信号的响应能力,当体外模拟肌损伤环境(如添加炎症因子或机械刺激)时,成肌细胞可激活损伤修复相关基因表达,加速增殖分化,为研究肌损伤修复机制提供理想模型。培养条件上,这类细胞适合在含 10%-20% 胎牛血清的 DMEM 高糖培养基(或专用成肌细胞培养基)中生长,于 37℃、5% CO?培养箱内,增殖期倍增时间约 24-36 小时,培养过程中核型(多数保持大鼠正常二倍体核型)与增殖分化功能稳定,为实验结果的可靠性提供保障。
在生理功能与疾病关联方面,这类来源于大鼠骨骼肌的成肌细胞是维持肌肉稳态、参与肌损伤修复的关键细胞。生理状态下,其作为骨骼肌中的 “储备干细胞"(又称卫星细胞),平时处于静息状态,当骨骼肌受到损伤(如机械损伤、缺血损伤)时,会被快速激活并进入增殖期,通过大量分裂产生新的成肌细胞,随后分化为肌纤维,替代受损组织,实现肌肉再生;同时,在正常肌肉生长发育过程中,成肌细胞的增殖分化也为肌纤维增粗、肌肉量增加提供细胞来源。病理状态下,其功能异常与多种肌肉疾病密切相关:例如在肌wei缩症中,成肌细胞激活能力下降,增殖分化速度无法匹配肌纤维流失速度,导致肌肉量逐渐减少;在肌营养不良中,基因突变导致成肌细胞分化异常,无法正常形成成熟肌纤维,引发肌肉功能障碍;此外,长期卧床、衰老等因素也会导致成肌细胞活性降低,加剧肌肉衰减,影响机体运动能力。
在多领域研究应用方面,这类来源于大鼠骨骼肌的成肌细胞是解析肌肉生物学特性、构建疾病模型及研发治疗方案的重要工具?;⊙芯恐校蒲腥嗽笨赏ü逋獾骺嘏嘌跫?,观察成肌细胞增殖分化过程中的基因表达变化(如肌分化因子 MyoD、肌细胞生成素 Myogenin 的表达规律),明确肌肉发育与再生的分子调控机制(如 MAPK、PI3K 信号通路的作用);同时利用基因编辑技术(如 CRISPR-Cas9)敲除或过表达致病基因,构建肌营养不良等疾病的细胞模型,探究疾病发病机制。疾病模型构建中,可将该细胞移植到肌肉损伤或疾病模型大鼠体内(如肌缺血模型、肌wei缩模型),观察细胞在体内的存活、分化及对肌肉功能的修复效果,评估细胞治疗的可行性;也可在体外模拟疾病微环境(如高糖环境模拟糖尿病相关肌损伤),观察成肌细胞功能变化,为疾病机制研究提供实验依据。药物研发中,其可用于筛选促进肌肉再生或改善肌疾病的药物 —— 例如检测候选药物对成肌细胞增殖活性、肌管形成效率的促进作用,为肌wei缩治疗药物研发提供靶点验证;同时还可用于评估药物对肌肉细胞的毒性,为临床用药安全性提供参考。此外,在组织工程研究中,该细胞常作为种子细胞与生物支架(如明胶支架、聚己内酯支架)结合,构建组织工程肌肉,探索其在临床肌肉缺损修复中的应用,目前该方向研究已在动物实验中取得初步进展。
从科研价值与学科发展来看,这类来源于大鼠骨骼肌的成肌细胞极大推动了运动医学、再生医学等领域的研究进展,为人类肌肉疾病的治疗提供重要理论支撑与实验基础。基础研究中,以其为模型的成果,助力科学家阐明了肌肉再生的细胞调控路径、成肌分化的分子网络,为理解肌肉生理功能奠定基础;临床转化方面,基于该细胞的研究成果,已推动多项肌肉损伤细胞治疗临床试验(如急性肌损伤修复),部分试验显示出良好的安全性与修复效果;同时,该细胞还为个性化医疗研究提供了可能,通过体外诱导分化为肌纤维,可用于药物敏感性检测,为精准治疗提供参考。此外,随着 3D 细胞培养技术的发展,将该细胞与血管内皮细胞、神经细胞共培养构建 “3D 肌肉类器官",可更真实模拟体内肌肉微环境,进一步提升实验结果的临床相关性,为肌肉疾病的精准化治疗提供新的技术平台。
综上所述,这类来源于大鼠骨骼肌的成肌细胞,凭借强增殖分化能力、可模拟肌肉再生过程及与人类成肌细胞的高度同源性,成为肌肉研究领域的 “核心功能细胞"。其在肌肉发育机制解析、肌疾病研究及细胞治疗探索中的应用,既推动了基础科研的突破,又为临床多种肌肉难治性疾病的治疗提供了新方向,对运动医学及再生医学学科的发展具有不可替代的科学价值。
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