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更新时间:2025-10-15
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大鼠成肌细胞
大鼠成肌细胞是从大鼠骨骼肌组织中分离培养获得的成体干细胞群体,因具备强增殖分化能力、可定向形成肌纤维、与人类成肌细胞生理特性高度相似,且易体外模拟肌肉再生微环境,成为研究肌肉发育机制、肌损伤修复过程及肌肉相关疾?。ㄈ缂ei缩、肌营养不良)的核心模型细胞,在运动医学、再生医学及药理学基础研究中应用广泛,对临床肌肉疾病治疗与康复方案研发具有重要参考意义。
从细胞来源与培养特性来看,这类来源于大鼠肌肉组织的成肌细胞,原始组织多取自健康成年或幼年大鼠(常用 SD 大鼠、Wistar 大鼠)的四肢骨骼?。ㄈ珉璩?、胫骨前?。?该部位肌肉纤维密集,成肌细胞(又称卫星细胞)储备丰富且活性强,是体外分离的理想来源。分离过程需先在无菌条件下剥离骨骼肌组织,去除筋膜与脂肪后剪碎为 1-2mm3 的组织块,用胶原酶与中性dan白酶分步消化,破坏肌纤维束结构以释放单个成肌细胞;随后通过 200 目细胞筛过滤去除未消化的组织碎片,收集细胞悬液后经低速离心纯化,再利用成肌细胞贴壁速度快于其他杂细胞(如成纤维细胞)的特性,通过短期贴壁培养进一步筛选,最终可获得纯度超过 90% 的成肌细胞。原代培养的细胞约 12-24 小时开始贴壁,初期呈圆形或短梭形,随着培养时间延长逐渐增殖为均一的长梭形细胞群落;传代培养时,细胞在增殖期(含血清培养基中)可稳定分裂,传代 5-8 代内仍保持成肌特性,当细胞密度达到 80%-90% 融合时,会自发进入分化阶段,因此需在增殖期及时传代以维持细胞活性,降低实验重复性成本;若需长期开展实验,可通过添加成肌细胞专用生长因子维持其增殖状态,或使用永生化成肌细胞系(如大鼠成肌细胞系 L6),避免频繁原代分离的繁琐操作。
在形态与生物学功能方面,这类来源于大鼠肌肉组织的成肌细胞呈现典型的成肌细胞特征与功能特异性。显微镜下观察,增殖期细胞呈均一长梭形,细胞核大而椭圆,位于细胞中央,细胞质内富含肌动蛋白、肌球蛋白前体及肌分化相关蛋白(如 MyoD),为后续肌纤维形成奠定物质基础;进入分化期后(切换至低血清或无血清培养基),细胞逐渐停止增殖,开始向彼此靠近并融合形成多核肌管,肌管进一步成熟后可显现明暗交替的肌横纹,具备类似成熟骨骼肌纤维的收缩功能。生物学功能上,其核心优势体现在两大方面:一是 “增殖 - 分化" 的动态调控能力,在体外可通过调整培养基成分精准控制细胞状态 —— 血清中的生长因子(如成纤维细胞生长因子)可促进细胞增殖,低血清环境则诱导细胞分化为肌管,wan美模拟体内肌肉生长与再生的核心过程;二是对肌损伤信号的响应能力,当体外模拟肌损伤环境(如添加炎症因子 TNF-α、IL-6 或施加机械拉伸刺激)时,成肌细胞会快速激活损伤修复相关基因(如 Myogenin、Desmin),加速增殖分化以补充受损肌纤维,为研究肌损伤修复的分子机制提供理想模型。培养条件上,这类细胞适合在含 10%-20% 胎牛血清的 DMEM 高糖培养基(或成肌细胞专用培养基)中生长,于 37℃、5% CO?培养箱内,增殖期倍增时间约 24-36 小时,培养过程中核型(多数保持大鼠正常二倍体核型)与增殖分化功能稳定,为实验结果的可靠性提供保障。
在生理功能与疾病关联方面,这类来源于大鼠肌肉组织的成肌细胞是维持肌肉稳态、实现肌损伤再生的关键 “储备力量"。生理状态下,成肌细胞以静息态卫星细胞的形式附着于肌纤维表面,当骨骼肌受到机械损伤、缺血或炎症刺激时,静息卫星细胞会被快速激活,进入增殖期产生大量成肌细胞,随后一部分成肌细胞继续增殖以维持干细胞库,另一部分则分化为肌管并融合到受损肌纤维中,完成肌肉修复;同时,在幼年大鼠肌肉生长发育过程中,成肌细胞的持续增殖与分化也是肌纤维增粗、肌肉量增加的核心动力。病理状态下,成肌细胞功能异常直接导致肌肉疾病的发生与发展:例如在肌wei缩症中,成肌细胞激活能力下降,增殖分化速度无法匹配肌纤维流失速度,导致肌肉量逐渐减少、肌力下降;在肌营养不良中,基因突变(如 dystrophin 基因缺陷)导致成肌细胞分化异常,无法形成结构完整的肌纤维,肌纤维易受损且难以修复,最终引发进行性肌肉功能障碍;此外,长期卧床、衰老或糖尿病等因素,也会通过抑制成肌细胞活性、干扰分化过程,加剧肌肉衰减,影响机体运动能力。
在多领域研究应用方面,这类来源于大鼠肌肉组织的成肌细胞是解析肌肉生物学、研发肌肉疾病治疗方案的 “多功能工具"?;⊙芯恐?,科研人员可通过体外培养观察成肌细胞增殖分化过程中的基因表达变化,明确肌肉发育相关信号通路(如 MAPK、PI3K-AKT)的调控作用,例如通过敲除 MyoD 基因观察细胞分化受阻现象,验证该基因在肌分化中的核心地位;同时,利用成肌细胞与其他细胞(如神经细胞、血管内皮细胞)的共培养体系,可研究神经 - 肌肉接头形成、肌肉血管化等复杂生理过程,为理解肌肉功能完整性的调控机制提供新视角。疾病模型构建中,可通过基因编辑技术(如 CRISPR-Cas9)敲除致病基因,构建肌营养不良、肌wei缩等疾病的细胞模型,观察细胞形态与功能变化,筛选潜在治疗靶点;也可将成肌细胞移植到疾病模型大鼠体内(如肌缺血模型、肌损伤模型),通过检测肌肉再生面积、肌力恢复情况,评估细胞治疗的有效性,为临床肌肉疾病的细胞治疗提供实验依据。药物研发中,其是筛选 “促肌肉再生" 或 “抗肌肉衰减" 药物的核心模型 —— 例如通过检测候选药物对成肌细胞增殖活性、肌管形成效率的影响,评估药物促进肌肉修复的潜力;同时,利用成肌细胞模型还可研究药物对肌肉的毒性,避免药物引发的肌损伤副作用。此外,在组织工程研究中,成肌细胞常作为种子细胞与生物支架(如明胶海绵、聚己内酯纳米纤维支架)结合,构建具有收缩功能的组织工程肌肉,用于修复大鼠肌肉缺损模型,目前该方向研究已在动物实验中实现肌肉缺损的有效修复,为临床肌肉缺损治疗提供新方案。
从科研价值与学科发展来看,这类来源于大鼠肌肉组织的成肌细胞极大推动了运动医学、再生医学与肌肉疾病研究的进步,为人类肌肉健康领域的突破提供重要支撑?;⊙芯恐校?strong>大鼠成肌细胞为模型的成果,助力科学家阐明了肌肉再生的 “卫星细胞激活 - 增殖 - 分化" 调控网络,明确了肌分化关键基因的功能,为理解人类肌肉生理功能奠定基础;临床转化方面,基于成肌细胞的细胞治疗方案已在大鼠肌损伤模型中取得显著效果,为人类急性肌损伤、肌营养不良的临床治疗提供参考;同时,利用成肌细胞建立的药物筛选体系,已成为研发抗肌wei缩、促肌肉修复药物的重要环节,加速了药物研发进程。此外,随着 3D 生物打印技术的发展,将成肌细胞与生物材料结合打印 “3D 肌肉组织",可更真实模拟体内肌肉的三维结构与功能,进一步提升实验结果的临床相关性,为肌肉疾病的精准研究与个性化治疗提供新平台。
综上所述,这类来源于大鼠肌肉组织的成肌细胞,凭借 “增殖 - 分化" 的可控性、与人类成肌细胞的高度同源性及便捷的培养特性,成为肌肉研究领域的 “核心功能模型"。其在肌肉发育机制解析、肌疾病研究及药物与细胞治疗研发中的应用,既推动了基础科研的突破,又为临床肌肉疾病的治疗提供了重要支持,对运动医学、再生医学学科的发展具有不可替代的科学价值。
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