Reh人急性非B非T淋巴细胞性白血病细胞

Reh人急性非B非T淋巴细胞性白血病细胞是急性淋巴细胞白血?。ˋLL）亚型研究与精准治疗探索的关键模型，源自一名 15 岁急性非 B 非 T 淋巴细胞性白血病患者的骨髓原代细胞，经体外分离、克隆纯化及长期传代培养建立。作为罕见的非 B 非 T 系 ALL 细胞系，它既解决了该亚型原代细胞获取难、体外存活周期短的问题，又能稳定保留非 B 非 T 淋巴细胞白血病的核心分子表型与恶性特征，尤其在模拟儿童 ALL 的病理生物学行为方面表现突出，成为研究非 B 非 T 系 ALL 发病机制、异常信号通路及靶向药物筛选的理想工具，广泛应用于血液肿瘤学基础研究、白血病分型诊断及个性化治疗方案研发等领域。

从生物学特性来看，Reh 细胞呈现 “非 B 非 T 淋巴细胞白血病特异性形态 + 分子表型" 的双重优势。光学显微镜下，细胞具典型急性淋巴细胞白血病细胞形态：呈圆形或类圆形，胞体直径约 8-12μm，胞质少且呈嗜碱性（经瑞氏染色呈淡蓝色），胞质内偶见细小嗜天青颗粒；细胞核大而圆，占细胞体积的 2/3 以上，染色质呈细致颗粒状，核仁明显（多为 1-2 个），核型分析显示存在染色体异常（如 t (12;21) 易位，形成 TEL-AML1 融合基因），这一特征与临床儿童非 B 非 T 系 ALL 的常见遗传学改变高度一致。功能层面，其核心价值在于三大关键特性：一是明确的免疫表型特征，通过流式细胞术检测可发现，细胞不表达 B 淋巴细胞标志物（如 CD19、CD20、CD22）与 T 淋巴细胞标志物（如 CD3、CD4、CD8），但表达早期造血细胞标志物（如 CD34、CD10、HLA-DR），符合非 B 非 T 系 ALL 的免疫分型标准，为细胞亚型鉴定提供直接依据；二是活跃的增殖与凋亡特性，细胞以悬浮方式快速增殖，对数期倍增时间约为 24-36 小时，且对诱导凋亡的刺激（如药物、射线）敏感，凋亡率在药物处理后可提升 30%-50%，模拟临床白血病细胞对治疗的应答过程；三是异常信号通路激活，细胞内存在 Ras/MAPK、PI3K/Akt 等信号通路的持续性激活，这些通路异常与白血病细胞的无限增殖、凋亡抵抗密切相关，为机制研究提供了明确靶点。

在培养操作与质量控制层面，Reh 细胞的培养需重点关注 “维持悬浮生长状态与白血病表型稳定"，避免因培养条件不当导致细胞分化或死亡。培养基选择上，常规使用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培养基，并添加 1% 广谱抗菌剂 ——RPMI-1640 培养基的营养成分更适配淋巴细胞生长，广谱抗菌剂可预防细菌污染；血清需经过支原体检测与血液肿瘤细胞兼容性验证，确保无有害微生物且富含淋巴细胞增殖所需的细胞因子（如 IL-2、IL-7）。培养操作时，需使用无菌三角烧瓶或培养瓶进行悬浮培养，避免使用贴壁培养容器；传代时无需消化，直接取对数期细胞悬液，按 1:3-1:5 的比例加入新鲜培养基即可，传代周期约为 2-3 天，需密切监测细胞密度（维持在 1×10?-1×10?个 /mL），密度过高易导致营养不足、细胞活力下降。质量控制需增加 “白血病表型验证" 维度：通过流式细胞术检测 CD34、CD10 的阳性表达率（均需≥80%），确认非 B 非 T 系表型稳定；通过 CCK-8 法检测细胞增殖活性（OD 值在对数期需呈线性增长），确保增殖功能正常；通过染色体核型分析验证 t (12;21) 易位或其他特征性核型，避免遗传背景漂移，全fang位保障细胞符合实验需求。

在科研应用领域，Reh 细胞凭借 “亚型特异性强 + 临床相关性高" 的优势，在非 B 非 T 系 ALL 研究中发挥不可替代的作用。白血病发病机制研究是其核心应用场景 —— 科研人员可利用细胞的 TEL-AML1 融合基因背景，解析该融合基因的致癌机制：例如通过基因沉默技术抑制 TEL-AML1 表达，观察细胞增殖速率、凋亡率及下游靶基因（如 p21、Bax）的表达变化，明确该融合基因在白血病发生中的驱动作用；同时，研究 Ras/MAPK 通路抑制剂对细胞的影响，可为靶向异常信号通路的治疗提供实验依据。药物筛选与耐药机制研究方面，Reh 细胞是评估抗白血病药物活性的理想工具 —— 在新型抗白血病药物或靶向信号通路药物研发中，通过梯度给药检测药物对细胞增殖的抑制率，计算 IC??值筛选有效药物；此外，通过长期低剂量药物诱导构建耐药细胞株（如 Reh/MTX 耐药株），对比敏感株与耐药株的基因表达差异（如 ABC 转运蛋白上调、相关代谢酶活性改变），解析耐药机制，为开发耐药逆转策略（如联合使用 ABC 转运蛋白抑制剂）提供数据支撑。白血病诊断标志物研究中，细胞可用于验证新型标志物的临床价值：例如通过转录组测序筛选非 B 非 T 系 ALL 特异性表达的 lncRNA 或 miRNA，在 Reh 细胞中过表达或沉默该分子，观察其对细胞恶性表型的影响，进而验证其作为诊断标志物或治疗靶点的潜力。此外，细胞还可用于特异性细胞杀伤策略研究，如构建靶向 Reh 细胞表面 CD10 抗原的杀伤性细胞，观察其对 Reh 细胞的杀伤效果，为非 B 非 T 系 ALL 的新型细胞治疗提供前期实验基础。

不过，使用 Reh 细胞需注意其局限性。该细胞系仅代表携带 TEL-AML1 融合基因的非 B 非 T 系 ALL 亚型，无法wan全模拟其他遗传学背景（如 MLL 重排、Ph 染色体阳性）的非 B 非 T 系 ALL，研究不同亚型时需搭配对应细胞系补充验证。细胞为体外长期传代培养的肿瘤细胞，部分生物学特性可能与原代白血病细胞存在差异（如细胞因子依赖性降低），研究结果需结合患者原代细胞或动物模型（如免疫缺陷小鼠移植瘤模型）进一步验证。此外，长期传代可能导致细胞染色体异常比例下降或耐药基因自发激活，需定期冻存早期传代细胞（如 P5-P10 代），并在实验前通过核型分析与药物敏感性检测确认细胞特性稳定，避免因表型漂移影响实验结果的可靠性与重复性。