WML2小鼠肺成纤维细胞

WML2小鼠肺成纤维细胞是体外研究肺部生理功能、病理进程及药物筛选的重要细胞模型，源自小鼠肺组织中的成纤维细胞，经标准化培养与鉴定后，保留了原代肺成纤维细胞的核心生物学特性，为肺部疾病机制解析、药物研发等领域提供了稳定且可靠的实验工具，在呼吸系统相关研究中具有不可替代的作用。

从细胞来源与生物学特征来看，该细胞系分离自正常小鼠的肺间质组织，肺成纤维细胞作为肺间质的主要功能细胞，在维持肺组织结构完整性、参与肺组织修复与重塑过程中发挥关键作用，而 WML2 细胞高度还原了这一功能属性。在形态上，该细胞呈现典型的成纤维细胞样形态，胞体呈梭形或长梭形，细胞核呈椭圆形，位于细胞中央，细胞质丰富且均匀，在体外贴壁培养时，细胞会有序排列生长，融合后呈现出 “漩涡状" 或 “放射状" 的生长特征，这一形态特征与体内肺成纤维细胞的形态高度一致，为实验观察与鉴定提供了直观依据。此外，该细胞还保留了肺成纤维细胞te有的标志物表达，如波形蛋白（Vimentin）、成纤维细胞特异性蛋白 1（FSP-1）等，通过免疫荧光染色或 Western blot 检测可明确其细胞身份，确保实验用细胞的纯度与特异性，避免因细胞污染或身份混淆影响实验结果。

在培养条件与操作要点方面，WML2 小鼠肺成纤维细胞对培养环境的适应性较强，常规实验室条件即可满足其生长需求。培养基推荐使用含 10%-15% 胎牛血清（FBS）的 DMEM/F12 混合培养基，该培养基能为细胞提供充足的营养物质，如氨基酸、维生素、矿物质等，同时胎牛血清中的生长因子可促进细胞增殖与活性维持；培养环境需维持在 37℃、5% CO?的恒温培养箱中，CO?浓度可维持培养基 pH 值稳定在 7.2-7.4 的适宜范围，保证细胞正常代谢与生长。传代操作时，需密切观察细胞融合度，当细胞融合度达到 70%-80% 时进行传代，此时细胞活性最佳，传代后增殖能力强。传代前需用磷酸盐缓冲液（PBS）清洗细胞 2-3 次，去除残留的培养基与代谢废物，随后加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液，37℃孵育 1-2 分钟，待细胞形态变为圆形、间隙增大时，加入含血清的培养基终止消化，轻轻吹打细胞使其分散成单细胞悬液，按 1:3-1:5 的比例接种至新培养瓶中。培养过程中需每 2-3 天更换一次培养基，及时清除细胞代谢产生的乳酸、氨等有害物质，避免其积累影响细胞活性；同时需严格遵守无菌操作规范，接种、传代、换液等操作均需在超净工作台内进行，培养基、PBS、消化液等试剂使用前需经高压灭菌或过滤除菌处理，定期对培养箱、超净工作台进行清洁与消毒，防止细菌、真菌或支原体污染，确保细胞培养的稳定性与安全性。此外，细胞冻存时建议使用含 10% 二甲基亚砜（DMSO）、20% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基作为冻存液，将细胞浓度调整为 1×10?-1×10?个 /mL，按照 4℃放置 30 分钟、-20℃放置 1 小时、-80℃过夜的梯度降温方式处理后，转入液氮长期保存，复苏时需将冻存管迅速放入 37℃水浴锅中融化，离心去除冻存液后接种至新鲜培养基，可有效提高细胞复苏率。

在功能特点与科研应用领域，WML2 小鼠肺成纤维细胞凭借其贴近体内肺成纤维细胞的功能特性，被广泛应用于肺部疾病机制研究、药物筛选及细胞生物学研究等方面。在肺部疾病机制研究中，该细胞是探究肺纤维化、慢性阻塞性肺疾病（COPD）、肺部感染等疾病的核心模型。例如，在肺纤维化研究中，肺成纤维细胞的异常增殖与活化是疾病发生的关键环节，研究人员可通过向 WML2 细胞中加入转化生长因子 -β（TGF-β）、血小板衍生生长因子（PDGF）等细胞因子，模拟体内肺成纤维细胞活化过程，观察细胞增殖速率、胶原蛋白合成量、α- 平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达水平的变化，进而解析肺纤维化的分子机制；同时，还可利用该细胞构建肺纤维化体外模型，筛选具有抗纤维化作用的药物，通过检测药物对细胞增殖、胶原合成的抑制效果，评估药物的疗效与安全性。在慢性阻塞性肺疾病研究中，WML2 细胞可用于研究香烟提取物、空气污染颗粒等有害物质对肺成纤维细胞功能的影响，观察细胞炎症因子（如 IL-6、TNF-α）分泌水平、氧化应激反应的变化，揭示环境因素在 COPD 发病中的作用机制。

在药物筛选方面，该细胞系可作为肺部疾病治疗药物的体外评价模型，用于筛选针对肺纤维化、肺部炎症等疾病的候选药物。例如，在抗肺纤维化药物筛选中，可将候选药物与活化的 WML2 细胞共培养，通过 MTT 法检测细胞增殖抑制率、ELISA 法检测胶原蛋白分泌量、Western blot 法检测纤维化相关蛋白（如 ColⅠ、α-SMA）的表达水平，综合评估药物的抗纤维化活性；同时，还可利用该细胞研究药物的作用靶点与信号通路，为药物研发提供分子机制依据。此外，在细胞生物学研究中，WML2 小鼠肺成纤维细胞还可用于研究细胞增殖、分化、凋亡、信号通路调控等基础生物学过程，为解析肺组织发育与稳态维持的分子机制提供实验数据。

综上所述，WML2 小鼠肺成纤维细胞凭借其稳定的生物学特性、便捷的培养条件及广泛的功能适用性，成为肺部疾病研究与药物研发领域的重要工具，为推动呼吸系统疾病机制解析、治疗策略优化及药物创新发挥了关键作用，未来在肺部精准医学研究中仍将具有广阔的应用前景。