QG-56人肺扁平上皮癌细胞

QG-56人肺扁平上皮癌细胞是源自人类肺扁平上皮癌（肺鳞癌）组织的贴壁生长细胞系，因稳定保留肺鳞癌的核心恶性特征（如角化倾向、侵袭性），且体外培养易操作、重复性高，成为研究肺鳞癌发病机制、肿瘤进展及药物筛选的经典体外模型，为肺鳞癌基础研究与临床转化提供关键实验载体。

一、核心生物学特性

细胞来源上，QG-56 细胞分离自肺鳞癌患者手术切除的肿瘤组织，经体外多次传代建系后，持续保留肺鳞癌的组织学与分子表型，与正常肺上皮细胞相比，具有明显的恶性增殖优势。形态上，QG-56 细胞呈多角形或梭形，贴壁生长时排列紧密却无规则，部分细胞可见胞质内角化颗粒（肺鳞癌典型特征）；胞质丰富且呈嗜酸性，细胞核大而不规则，核仁明显，染色质分布不均，常出现多核或核分裂象，符合肺扁平上皮癌细胞的恶性形态表现。

功能特性方面，QG-56 细胞具备肺鳞癌的核心恶性行为：增殖能力强，细胞周期约 28-34 小时，对数生长期增殖速度显著高于正常肺上皮细胞，且无接触抑制，密度过高时可堆叠生长；具有较强的侵袭与迁移能力，能分泌基质金属蛋白酶（MMP-1、MMP-9）降解肺泡基底膜，在 Transwell 实验中可高效穿透基质胶，模拟体内肺鳞癌局部浸润与远处转移过程；同时表达肺鳞癌特异性标志物，如细胞角蛋白 14（CK14）、细胞角蛋白 19（CK19）、p63 蛋白，这些标志物不仅是细胞鉴定的关键依据，也为肺鳞癌靶向实验提供明确靶点。此外，细胞基因组存在肺鳞癌常见分子异常，如 PI3K/AKT 通路激活、抑癌基因 p53 突变，进一步贴近临床肺鳞癌的分子病理特征。

二、体外培养关键条件

基础培养基选择以 RPMI-1640 为主，需添加 10%-12% 胎牛血清（无需额外添加诱导因子即可维持角化表型），满足细胞快速增殖对营养的需求，同时加入 1% 无菌防护试剂预防细菌污染。培养基 pH 需控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 280-320mOsm/kg，可通过添加 10mM HEPES 缓冲液增强 pH 稳定性，避免环境波动影响细胞活性。

培养环境需严格控制为 37℃、5% CO?的恒温恒湿条件，湿度保持在 95% 以上，防止培养基因水分蒸发导致渗透压升高。因细胞贴壁生长且增殖较快，传代周期约 2-3 天，传代时需先用消化液处理（37℃孵育 1.5-2.5 分钟），待细胞边缘收缩、脱离培养瓶壁时，加入含血清的培养基终止消化，轻柔吹打制成单细胞悬液，按 1:4-1:6 比例接种至新培养瓶。需注意细胞汇合度达 80% 时及时传代，避免密度过高导致细胞缺氧、代谢废物积累，影响角化表型与增殖活性。

细胞维护中，每日需通过倒置显微镜观察：若发现细胞角化颗粒减少、形态变圆或培养基浑浊，需及时更换培养基或排查污染；若增殖速度减慢，需检测血清质量或排查支原体污染。冻存时使用含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的胎牛血清作为冻存液，梯度降温（4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮保存），复苏时 37℃水浴快速解冻，立即加入 5 倍体积培养基稀释，复苏存活率通?？纱?75% 以上。

三、主要实验应用场景

在肺鳞癌发病机制研究中，QG-56 细胞是核心模型?？蒲腥嗽笨赏ü?CRISPR-Cas9 技术敲除或过表达肺鳞癌相关基因（如 p53、PI3K），观察细胞增殖、凋亡及角化能力的变化，明确基因在肿瘤发生中的调控作用；也可通过转录组测序，筛选肺鳞癌进展相关差异基因（如 EGFR、FGFR1），解析肿瘤恶性转化的分子通路，为肺鳞癌早期诊断提供潜在标志物。

药物筛选领域，QG-56 细胞应用广泛。可将不同浓度的肺鳞癌治疗药物（如靶向抑制剂、hua疗药物前体）作用于细胞，通过 MTT 法检测细胞活力，计算半数抑制浓度（IC50），评估药物杀伤效果；也可构建药物耐药细胞株，研究耐药基因（如 ABCG2、BCL-2）的表达变化，探究耐药机制，为逆转肺鳞癌耐药提供实验依据。此外，因细胞表达特异性标志物，可通过检测药物对标志物表达的影响，辅助评估药物对肿瘤表型的调控作用。

在肿瘤微环境研究中，QG-56 细胞可模拟肺鳞癌与微环境的相互作用。通过与肺成纤维细胞、免疫细胞（如巨噬细胞）共培养，观察微环境细胞对肿瘤细胞侵袭能力的影响；也可研究细胞因子（如 IL-6、TGF-β）对肿瘤细胞上皮 - 间质转化（EMT）的诱导作用，解析微环境在肺鳞癌转移中的作用，为靶向微环境的治疗策略提供基础。

四、实验应用注意事项

实验前需通过免疫荧光或 Western blot 验证细胞标志物（CK14、p63）的表达，确保恶性表型稳定，避免传代超过 30 代导致角化表型退化；不同批次血清对细胞增殖与角化影响较大，需通过预实验筛选适配血清并固定使用。

消化过程需严格控制时间，避免过度消化损伤细胞或消化不充分影响传代；操作需无菌，QG-56 细胞对支原体敏感，每传代 3 次需通过 PCR 检测支原体，污染后需立即丢弃以防交叉感染。

结果解读需结合临床肺鳞癌特征，体外模型无法wan全模拟体内微环境（如气道结构、免疫抑制），结论需结合动物移植瘤模型或临床样本数据综合分析；同时需与肺腺癌细 - 胞系（如 A549）对比，明确肺鳞癌独特机制，避免结果片面。