RAW264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞

RAW264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞是免疫学与肿瘤学研究的重要体外模型，源自 BALB/c 小鼠腹腔单核巨噬细胞白血病组织，因能稳定模拟单核巨噬细胞的功能特性与白血病细胞的恶性表型，在炎症机制解析、免疫调控研究及抗肿瘤药物筛选中应用广泛，为科研人员探索相关疾病机制提供了关键实验工具。

一、核心生物学特性

从细胞来源来看，该细胞系分离自患有单核巨噬细胞白血病的 BALB/c 小鼠腹腔，经体外培养建系后，仍保留原代单核巨噬细胞的核心功能与白血病细胞的恶性特征。形态上，RAW264.7 细胞呈不规则圆形或梭形，体外培养时以贴壁生长为主，部分细胞呈半悬浮状态，胞质丰富且含少量颗粒，细胞核呈椭圆形或不规则形，核仁清晰，符合单核巨噬细胞与恶性肿瘤细胞的双重形态特点。

功能特性方面，RAW264.7 细胞具备典型的单核巨噬细胞功能，如较强的吞噬能力，可通过胞吞作用吞噬细菌、凋亡小体及异物，模拟体内单核巨噬细胞的清除功能；同时能被脂多糖（LPS）、干扰素 -γ（IFN-γ）等刺激活化，活化后大量分泌肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）、白细胞介素 - 6（IL-6）、一氧化氮（NO）等炎症介质，参与炎症反应调控。作为白血病细胞系，其还具有恶性增殖能力，细胞周期调控异常，G2/M 期细胞比例升高，且对hua疗药物（如阿mei素、长春新碱）存在一定敏感性差异，可用于白血病耐药机制研究。此外，细胞表达单核巨噬细胞特异性标志物，如 CD11b、F4/80，以及巨噬细胞清道夫受体（SR-A），进一步印证其单核巨噬细胞的身份。

二、体外培养关键条件

基础培养基的选择对细胞生长至关重要，RAW264.7 细胞常规使用 DMEM 高糖培养基，需添加 10% 胎牛血清以补充生长必需的营养因子（如集落刺激因子、氨基酸），同时加入 1% 无菌防护试剂抑制细菌污染。培养基 pH 值需维持在 7.2-7.4，渗透压控制在 280-320mOsm/kg，确保细胞正常代谢与生长。

培养环境需严格控制，细胞需置于 37℃、5% CO?的恒温培养箱中，培养箱内湿度保持在 95% 以上，避免培养基过度蒸发导致渗透压改变。由于细胞以贴壁生长为主，传代时需先用合适的细胞消化试剂处理，待细胞间隙增大、形态变圆后，加入含血清的培养基终止消化，轻轻吹打制成细胞悬液，按 1:3-1:5 的比例接种至新培养瓶，传代周期一般为 2-3 天，具体可根据细胞汇合度调整（通常汇合至 70%-80% 时进行传代，避免细胞过度密集影响活性）。

细胞维护过程中，需每日观察细胞状态：若发现细胞贴壁能力下降、形态变圆且脱壁增多，或培养基出现浑浊、颜色变黄速度加快，可能提示细胞活力下降或污染；若细胞生长缓慢，可检查血清质量或调整培养温度。此外，细胞冻存时需使用含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的胎牛血清作为冻存液，梯度降温（4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存），复苏时需快速解冻（37℃水浴 1-2 分钟）并立即加入培养基，减少细胞损伤。

三、主要实验应用场景

在炎症机制研究中，RAW264.7 细胞是经典模型?？蒲腥嗽笨赏ü?LPS、IFN-γ 等刺激细胞活化，检测细胞分泌的炎症介质（如 TNF-α、IL-6、NO）含量，或分析炎症信号通路（如 NF-κB、MAPK）中关键分子（如 p65、p38）的磷酸化水平，探究炎症反应的调控机制，为抗炎药物研发提供靶点验证依据。

免疫调控研究领域，该细胞应用广泛?？赏ü?T 细胞、B 细胞共培养，观察其对免疫细胞增殖、分化的影响，探究单核巨噬细胞在 adaptive immunity 中的调控作用；也可研究药物或活性成分（如中药提取物、益生菌代谢产物）对细胞吞噬功能、炎症介质分泌的调节效果，为免疫调节剂研发提供实验支持。

在肿瘤研究与药物筛选方面，RAW264.7 细胞可用于抗肿瘤药物的体外活性评估。通过将不同浓度的药物作用于细胞，采用 MTT 法、CCK-8 法检测细胞活力，计算半数抑制浓度（IC50），评估药物对白血病细胞的杀伤效果；同时可构建药物耐药细胞株，分析耐药相关基因（如 MDR1、BCL-2）的表达变化，探究白血病耐药机制，为逆转耐药提供实验思路。此外，该细胞还可用于肿瘤免疫微环境研究，通过与肿瘤细胞共培养，观察其对肿瘤细胞增殖、侵袭的影响，解析单核巨噬细胞在肿瘤微环境中的作用。

四、实验应用注意事项

实验前需确保细胞处于对数生长期，此时细胞活力较高（通常＞90%），吞噬功能与炎症介质分泌能力稳定，能保证实验结果的重复性。不同批次的胎牛血清成分存在差异，可能影响细胞的活化状态与增殖速度，建议固定血清品牌并进行预实验验证，确保血清适合细胞生长与功能研究。

无菌操作是细胞培养与实验的基础，RAW264.7 细胞对污染较为敏感，操作过程中需严格遵守无菌规范，定期检测细胞是否存在支原体污染（可通过 PCR 法或支原体检测试剂盒检测），若发现污染需立即丢弃受污染细胞，避免交叉感染影响其他细胞株。

在结果解读时需保持严谨性，该细胞系虽能模拟单核巨噬细胞的功能与白血病细胞的特性，但体外培养环境与体内生理环境存在差异（如缺乏体内复杂的免疫细胞相互作用、细胞外基质成分），实验结果需结合动物模型（如小鼠炎症模型、白血病移植模型）或临床样本数据进一步验证，避免单一依赖细胞模型导致结论偏差。此外，在进行炎症相关实验时，需注意 LPS 等刺激剂的浓度与作用时间，避免因刺激过强导致细胞过度活化或死亡，影响实验结果准确性。